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高效液相色谱法测定北沙参中的蔗糖及其指纹图谱(二)

来源:时间:2025-04-22 04:20:46

2.4 精密度試驗

S2號樣品溶液,高效連續進樣6次,液相進行HPLC指紋圖譜分析。色谱沙参分別記錄各共有峰的法测保留時間和峰麵積,並對其峰麵積結果進行統計分析,定北結果見表7(其中4號峰為蔗糖色譜峰)。中的蔗糖指纹表7結果表明,图谱各共有峰峰麵積的高效相對標準偏差均小於3%,說明該方法精密度良好。液相

2.5 穩定性試驗

S2號樣品溶液,色谱沙参在室溫下保存,法测分別於0、定北2、中的蔗糖指纹4、图谱8、高效24h測定,結果見表8。由表8可知,各共有峰峰麵積的相對標準偏差均小於3%,說明北沙參樣品溶液在24h內是穩定的。

2.6 重複性試驗

取S2號樣品,按照樣品溶液的製備方法,平行製備6份供試液,分別進樣,記錄HPLC色譜峰麵積,計算北沙參樣品中的蔗糖含量,結果見表9。由表9可知,測定結果的相對標準偏差均小於3%,說明該方法具有良好的重複性。

2.7 回收試驗

取已知蔗糖含量的北沙參粉末約2g,精密稱定,平行6份,分別加入蔗糖對照品約60mg,按照樣品溶液的製備方法製備供試液,進行HPLC測定,結果見表10。由表10可知,平均回收率為98.85%,表明該方法準確度較高。

2.8 指紋圖譜的建立

將對照品溶液和各批北沙參樣品溶液分別進樣,記錄HPLC色譜數據。選擇了6個色譜峰為共有峰,以4號峰為參照峰,計算各共有峰的相對保留時間和相對峰麵積值,結果見表11、表12。

2.9 指紋圖譜相似度分析

采用國家藥典委員會開發的中藥色譜指紋圖譜相似度評價係統研究版(2004A),對10批北沙參藥材的指紋圖譜進行相似度分析。該軟件具有生成校對照圖譜的功能,相似度計算方法為夾角餘弦法,可支持多點校正。首先將實驗數據導入中藥指紋圖譜相似度計算軟件,選定4號峰為參比峰,設定中位數的匹配模式,將色譜峰進行多點校正後自動匹配,即自動生成對照譜峰,相似度計算結果見表13。由表13可知,與對照指紋圖譜相比,10批北沙參藥材平均相似度為0.985,相似性結果良好;北沙參藥材之間的相似度值為0.917~1.000,說明各批藥材間存在差異。因此本實驗所建立的HPLC指紋圖譜可作為北沙參藥材質量控製的有效手段之一。

3 結語

建立了HPLC-ELSD法測定北沙參蔗糖含量的方法,該法測定蔗糖保留時間穩定,測定結果準確、精密度高、回收率符合檢測要求。與紫外檢測器比較,具有幹擾少、基線無漂移、專屬性強等特點。建立了北沙參藥材的指紋圖譜,不同來源北沙參藥材之間雖存在一定差異,但整體相似度良好,可作為北沙參藥材的質量控製的有效手段之一。2020版藥典中並沒有對北沙參的含量進行規定,僅通過性狀鑒別無法全麵的評價藥材質量,本研究可以為更好地評價北沙參的質量提供參考。

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