為掌握4株內生真菌的生物學特性，選擇CPDA、牛肝Pachlewski、菌内菌分MMN為供試培養基，定及研究3種培養基對菌絲生長速度的其生影響，25℃培養，物学在9cm的特性平板上采用十字交叉法測量菌落直徑，結果如圖4所示。野生由圖4可知，牛肝在培養第4d時進行菌落直徑測量，菌内菌分CPDA上的定及生長速度明顯優於其他2種培養基，內生真菌LCTG12培養5d，其生LCCK-6培養6d，物学BSHC-18培養7d，特性BBFO-10培養8d可長滿平板，野生故選擇CPDA培養基為4種內生真菌的最適培養基。
在上述實驗的基礎上，選擇CPDA培養基進行4種內生真菌的液態搖瓶實驗，在25℃，160r/min條件下培養0～10d，收集0、2、4、6、8、10d的菌絲，3次平行實驗統計結果如圖5所示。由圖5可知，0～8dLCTG12、LCCK-6、BBFO-10生物量均呈增長趨勢，第8d時LCTG-12的生物量為4.13g/L，LCCK-6為1.65g/L，BBFO-10為3.44g/L，此時生物量最大，之後不再增長，這可能與培養基中營養物質消耗殆盡有關。但是BSHC-18的液態發酵菌絲量增長緩慢，最高為1.14g/L，這與黃瘤孢菌（BSHC-18）的孢子繁殖的生物學特性有關，可見它不適於液態發酵生長菌絲。
為探究牛肝菌內生真菌之間是否存在拮抗關係，本實驗設計從牛肝菌中分出的3株內生真菌，進行對峙實驗，在25℃條件下培養5d，蓋姆斯木黴LCTG-12、黃瘤孢菌BSHC-18和尖孢鐮刀菌BBFO-10的對照組菌落形態如圖1-a-1、1-c-1和1-d-1所示，拮抗對峙圖如圖6所示。
由圖6a可知，蓋姆斯木黴對尖孢鐮刀菌的生長具有拮抗作用，其菌落與鐮刀菌接觸的邊界處，鐮刀菌有明顯向外退縮生長，由於每組對峙設置3組重複，故其對尖孢鐮刀菌的平均抑製率為53.7%；由圖6b可知，黃瘤孢菌與尖孢鐮刀菌之間可互相抑製生長，且黃瘤孢菌產黃色孢子的時間明顯延後，彼此的平均抑製率分別為：41.8%、33.6%；由圖6c可知，蓋姆斯木黴對黃瘤孢菌的生長有明顯的抑製作用，黃瘤孢菌未有產孢現象，其對黃瘤孢菌的平均抑製率為74.7%。
食藥用菌內生真菌是一類尚未充分開發與利用，並且應用前景廣泛的微生物，為探究野生牛肝菌中內生真菌資源，及分析其內生真菌間是否存在拮抗關係，本文從3種新鮮野生牛肝菌子實體中分離純化共得到23株純菌，篩選出4株具有典型特征的純菌進行形態觀察和ITSrDNA現代分子生物學鑒定，鑒定出4株內生真菌分別為蓋姆斯木黴、克魯伊假絲酵母、黃瘤孢菌及尖孢鐮刀菌，並對幾株內生真菌生物學特性進行研究，得出結論：CPDA培養基較適合這4株菌的生長，其中蓋姆斯木黴的生長速度較快，5d即可長滿9cm的平板，其餘3種菌株長滿板的時間分別為6、7、8d，並且蓋姆斯木黴對黃瘤孢菌和尖孢鐮刀菌菌絲生長均有拮抗作用，黃瘤孢菌和尖孢鐮刀菌兩者之間也具有拮抗作用。由於實驗采用人工合成培養基的局限性，故本研究所分離的菌株不能完全詮釋野生牛肝菌內生真菌的群係，其中蓋姆斯木黴菌株表現出的拮抗作用，表明其具有一定的生防應用潛力，可為牛肝菌等大型真菌生長過程中會出現的菇體腐爛和根腐病，提供一定的生防利用價值。內生真菌的次級代謝產物豐富，進一步研究其內生真菌能夠產生結構新穎、活性廣泛的次級代謝產物，對新型藥用資源開發具有重要的意義，而牛肝菌內生真菌代謝產物與其是否相同或相近還有待研究。本文也為之後野生牛肝菌人工馴化過程中，研究其內部環境與內生真菌的關係提供參考。
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