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转谷氨酰胺酶催化的糖基化修饰对黑豆蛋白抗氧化活性的影响(二)

来源:时间:2025-04-21 21:53:52

二、转谷結果與討論

1、氨酰胺酶不同製備的催化黑豆分離蛋白清除DPPH自由基能力

分別用PBS緩衝液配置濃度為:1mg/mL、2mg/mL、糖对黑豆蛋的影3mg/mL、基化4mg/mL、修饰响5mg/mL、白抗6mg/mL的氧化黑豆分離蛋白溶液、自交聯黑豆蛋白溶液、活性濕熱法糖基化黑豆蛋白溶液、转谷酶法糖基化黑豆蛋溶液以及對照物Trolox溶液;以DPPH的氨酰胺酶清除率為評價指標,對五種樣品溶液清除DPPH自由基能力進行比較,催化結果見表1。糖对黑豆蛋的影


由圖l可見:濃度為lmg/mL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、基化濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxDPPH自由基清除率均高於自交聯黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白,修饰响自交聯黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白隨濃度的增高DPPH自由基清除率無顯著性變化,濃度為lmg/mL~4mg/mL,酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxDPPH自由基清除率隨濃度的增高而增大,濃度為5mg/mL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxDPPH自由基清除率無顯著性差異,由表l可知,當濃度為6mg/mL時,酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxABTS+清除率達到最大,Trolox為90.67%,酶法糖基化黑豆蛋白為81.76%,濕熱法糖基化黑豆蛋白為75.37%;當濃度為5mg/mL時自交聯黑豆蛋白ABTS+清除率達到最大為9.35%,當濃度為4mg/mL時黑豆蛋白ABTS+清除率達到最大為7.73%;五種樣品清除DPP腎自由基能力大小為Trolox>酶法糖基化黑豆蛋白>濕熱法糖基化黑豆蛋白>自交聯黑豆蛋白>黑豆分離蛋白。

2、不同製備的黑豆分離蛋白清除ABTS+自由基能力

分別用PBS緩衝液配置濃度為:lmg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL、6mg/mL的黑豆分離蛋白溶液、自交聯黑豆蛋白溶液、濕熱法糖基化黑豆蛋白溶液、酶法糖基化黑豆蛋溶液以及對照物Trolox溶液;以ABTS+的清除率為評價指標,對五種樣品溶液清除ABTS+自由基能力進行比較,結果見表2。

由圖2可見:濃度為lmg/mLL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxABTS+自由基清除率均高於自交聯黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白,自交聯黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白隨濃度的增高ABTS+自由基清除率無顯著性變化,濃度為1mg/mL~4mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白ABTS+自由基清除率隨濃度的增高而增大,濃度為5mg/mL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白ABTS+自由基清除率無顯著性差異,濃度為lmg/mL~6mg/mL濕熱法糖基化黑豆蛋白以及TroloxABTS+自由基清除率隨濃度的增高而增大;從表2可知,當濃度為6mg/mL時,酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白、Trolox、自交聯黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白ABTS+清除率均達到最大,Trolox為76.08%,酶法糖基化黑豆蛋白為60.24%,濕熱法糖基化黑豆蛋白為49.28%,自交聯黑豆蛋白為4.33%,黑豆蛋白為4.79%;五種樣品清除DPPH+自由基能力大小為Trolox>酶法糖基化黑豆蛋白>濕熱法糖基化黑豆蛋白>自交聯黑豆蛋白>黑豆分離蛋白。

3、總還原能力

分別用PBS緩衝液配置濃度為:lmg/mL、2mg/mL、3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL、6mg/mL的黑豆分離蛋白溶液、自交聯黑豆蛋白溶液、濕熱法糖基化黑豆蛋白溶液、酶法糖基化黑豆蛋溶液以及對照物Trmox溶液;以吸光度為評價指標,對五種樣品溶總還原能力進行比較,結果見表3。


由圖3可見:濃度為lmg/mL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及Trolox總還原能力均高於自交聯黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白;自交聯黑豆蛋白以及黑豆分離蛋白隨濃度的增高總還原能力無顯著性變化,濃度為lmg/mL~6mg/mL酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白以及Trolox總還原能力隨濃度的增高而增大,從表3可知,當濃度為6mg/mL時,酶法糖基化黑豆蛋白、濕熱法糖基化黑豆蛋白、Trolox以及自交聯黑豆蛋白吸光值達到最大,總還原能力達到最強,Trolox為0.6169,酶法糖基化黑豆蛋白為0.4914,濕熱法糖基化黑豆蛋為0.2569,自交聯黑豆蛋白為0.0573。當濃度為2mg/mL時,黑豆分離蛋白吸光值達到最大,總還原能力達到最強為0.0581,五種樣品總還原能力大小為Trolox>酶法糖基化黑豆蛋白>濕熱法糖基化黑豆蛋白>黑豆分離蛋白>自交聯黑豆蛋白。

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