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超声辅助苦荞中蛋白和黄酮的同步提取工艺(一)

来源:时间:2025-04-21 08:58:44

蕎麥分為甜蕎和苦養,超声苦蕎又稱韃靼蕎麥,辅助為一年生草本植物,苦荞高約30cm~60cm。中蛋它含有蛋白質、白和步提維生素、黄酮不飽和脂肪酸等,取工有較高的超声營養價值和保健功能。養麥粉中蛋白質所占比例約為10%~15%,辅助含有豐富的苦荞賴氨酸精氨酸等必需氨基酸,中蛋以彌補穀類和蔬菜類蛋白質的白和步提緊缺。蕎麥中也含有其它穀物中沒有的黄酮蘆丁、槲皮素等黃酮類物質,取工具有極高的超声藥用價值和較強的抗氧化性,可以預防多種慢性疾病,如各種毛細管脆性引起的出血病、高血壓和心腦血管疾病,也可以強化心血管,降低血脂和膽固醇含量。目前關於蛋白質的提取方法主要有:堿溶酸沉、酶法提取、超聲輔助提取、微波輔助提取等方法。黃酮類化合物的提取方法有:堿溶酸沉、超聲輔助提取、酶法提取、微波輔助提取等方法,均提取了一種物質,本實驗以堿溶液作為提取劑,對苦蕎中養麥蛋白和黃酮類化合物進行超聲同步提取,克服了分步提取蕎麥蛋白和黃酮類物質工藝的缺點,並利用響應麵法優化提取工藝,為苦蕎的進一步開發提供技術支撐和理論依據。

一、材料與方法

1、原料與試劑

苦蕎麥:橫山縣陝北大地農業科技發展有限責任公司;蘆丁標準品、考馬斯亮藍G250(分析純):源葉生物有限公司;亞硝酸鈉(分析純):天津市福晨化學試劑廠;氫氧化鈉、無水乙醇、硝酸鋁、磷酸、石油醚(分析純):天津市天力化學試劑有限公司;牛血清蛋白(生化試劑):天津市化學試劑四廠;鹽酸(分析純):洛陽昊華化學試劑有限公司。

2、儀器與設備

儀器與設備見表1所示。

3、試驗方法

(1)工藝流程

苦蕎麥→清洗→烘幹→粉碎→脫脂→堿水溶解→超聲處理→離心→上清液→酸沉→沉澱→幹燥→苦養蛋白和黃酮提取物

(2)苦蕎中蕎麥蛋白和黃酮類化合物超聲同步提取條件優化方法

①粉碎粒度對苦蕎蛋白和黃酮類化合物超聲同步提取的影響

分別選取粉碎粒度為40目、60目、80目、100目,在液料比為30∶1mL/g,pH為9,超聲時間為40min,超聲溫度為65℃條件下進行超聲同步提取,計算得率。

②液料比對苦蕎蛋白和黃酮類化合物超聲同步提取的影響

分別選取液料比為10∶mL/g、20∶1mL/g、30∶1mL/g、40∶1mL/g、50∶1mL/g,在粉碎粒度為60目,pH為9,時間為40min,溫度為65℃條件下進行超聲同步提取,計算得率。

③pH對苦蕎蛋白和黃酮類化合物超聲輔助同步提取的影響

分別選取pH為7、8、9、10,在粉碎粒度為60目,液料比為30∶1mL/g,時間為40min,溫度為65℃條件下進行超聲同步提取,計算得率。

④時間對苦蕎蛋白和黃酮類化合物超聲輔助同步提取的影響分

分別選擇超聲時間20min、30min、40min、50min、60min、70min,粉碎粒度為60目,液料比為30∶1mL/g,超聲溫度為65℃條件下進行超聲同步提取,計算得率。

⑤溫度對苦養蛋白和黃酮類化合物超聲輔助同步提取的影響

選擇在35℃、45℃、55℃、65℃、75℃、85℃六個溫度條件下,粉碎粒度為60目,液料比為30∶1mL/g,時間為40min進行超聲同步提取,計算得率。

(3)總黃酮的測定。

(4)苦蕎提取液中養麥蛋白的測定。

二、結果與分析

1、標準曲線的繪製

(1)黃酮類化合物標準曲線的繪製

得出蘆丁質量濃度與吸光度之間的回歸方程為:A=12.585x一0.006,R2=0.9992,根據回歸方程計算總黃酮得率。

(2)苦養蛋白標準曲線的繪製

得出牛血清蛋白質量濃度與吸光度之間的回歸方程為:A=5.2957x+0.004,R2=0.9993,根據回歸方程計算蛋白得率。

2、苦蕎中蛋白和黃酮超聲同步提取條件的選擇

(1)單因素試驗結果

①粉碎粒度對苦養蛋白和黃酮類化合物超聲同步提取的影響隨著粉碎粒度的減小,苦蕎蛋白和黃酮得率隨之增大。當粒度達到60目時,兩者得率均達到最大值,分別為8.06%和1.17%。粉碎粒度減小有助於物料與溶劑之間充分接觸,促進溶解。當粒度小於60目時,粉碎機與物料之間過度摩擦,產生的熱量會破壞營養物質,使苦養蛋白和黃酮類物質得率逐漸減小。所以選擇60目為超聲同步提取的最佳粉碎粒度。

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