2.3選擇樣品提取方法

對比多次提取樣品的饲料方法，前處理條件為粉碎樣品，及食加剂將5g樣品放入具塞錐形瓶中，品添谱加入20 mL體積比1∶1的中聚水-乙醇溶液，含體積分數0.1%甲酸，氰胺10 min超聲波振蕩，效液相色然後過濾。饲料使用20 mL上述提取液再次提取殘渣，及食加剂過濾，品添谱合並濾液。中聚定容至5 mL。氰胺使用氮吹儀上濃縮，效液相色使用濾膜0.45μm過濾，饲料加入乙醇，及食加剂減少幹擾，品添谱促進水溶性蛋白的沉澱，加入甲酸，提升三聚氰胺的萃取率。使用MS/MS方法，可直接上機分析樣品提取液。

2.4線性範圍與檢出限

稀釋三聚氰胺標準貯備液，使用流動相操作，形成0.5、0.25、0.1、0.05、0.01 m，相關係數0.9993。回歸方程A=61956ρ+49 958。線性關係處於0.01～0.5 mg/L，呈現良好的範圍。0.01 mg/L為三聚氰胺檢出限。處理樣品，0.01 mg/kg為定量下限。

2.5精密度與回收率實驗

將飼料樣品分成3組，每組3份。每組樣品加入三聚氰胺標準溶液，分別為0.5、0.1、0.01 mg/kg。處理後檢測每個樣品。每個樣品檢測3次，相對標準偏差1.6%～5.1%。回收率為82%～99%。

2.6實際樣品測定檢測

樣品為100多個飼料和食品添加劑。顯示三聚氰胺含量0.11×104～4.5×104 mg/kg。部分樣品中含有三聚氰胺，檢測結果如下表。對於樣品與標準品的離子流色譜圖，如下圖。

3討論

三聚氰胺也稱為三聚氰酰胺、氰脲酰胺、密胺、三胺。無味，白色粉末。分子量126.12。分子式C3N6H6。屬於三嗪類含氮雜環有機化合物。三聚氰胺的相對密度為1570 kg/m3。354℃分解，極微溶於熱乙醇，微溶於冷水，能溶於熱乙二醇、乙酸、甲醇等。不溶於苯、乙醚等。在微堿性或中性環境下，三聚氰胺與甲酵縮合（劉韜等，2017）。三聚氰胺與草酸、鹽酸、乙酸等都能形成鹽，在微酸性環境下，三聚氰胺與經甲基的衍生物生成樹脂產物。三聚氰胺的主要用途是生產阻燃劑、膠水、塑料等，是三聚氰胺甲醛樹脂的原料。部分國家用於製造化肥。在食品和飼料中添加三聚氰胺可冒充蛋白（呂麗卿等，2017）。且凱氏定氮法不能檢出三聚氰胺，被一些不法分子利用。從源頭上監測三聚氰胺是保障人民群眾生命安全、畜牧業健康發展的重要方法（孟繁佳等，2020）。

三聚氰胺在動物體內沒有任何代謝變化。以原型或同係物形式經腎髒排泄。有研究表明，成年雄性大鼠經口給藥三聚氰胺，顯示通過尿液排泄大約90%的給藥劑量。相比血液中的含量，腎髒和膀胱更高，最高的是膀胱。尿液中的消除半衰期為3 h，血液為2.7 h（劉發全等，2019）。有給斷奶仔豬服用三聚氰胺化合物，結果顯示，血漿消除半衰期為4.04 h。三聚氰胺容易經腎髒排泄，對哺乳動物來說，三聚氰胺是低毒、微毒類化學物質。經口給予大鼠三聚氰胺，致死量為3.16 g/kg。經口給予小鼠三聚氰胺，致死量為4.55 g/kg。大鼠拌料口服14 d無不良反應的劑量是417 mg/（kg·d）。小鼠拌料口服13周1600 mg/（kg·d）為無不良反應劑量。大鼠吸入80～1130 mg/m3，每周6次，每日2次，持續超過4個月開始出現腎功能紊亂、中樞神經係統紊亂，體重增加遲滯，對腎髒造成損傷。三聚氰胺會引起試驗動物腎衰竭。長期攝入三聚氰胺會導致腎部、膀胱出現結石，損害泌尿係統、生殖係統，進一步誘發膀胱癌。美國食品藥品管理局研究認為，同時含有三聚氰酸、三聚氰胺會威脅嬰兒健康（商軍等，2019）。因此規定配方奶粉三聚氰胺含量不能高於百萬分之一，同時不得含有其他相近的化學品。

飼料和食品中違法添加三聚氰胺會危害畜牧業的發展和人民群眾身體健康。飼料和食品中添加三聚氰胺會造成營養虛高現象。使用添加三聚氰胺的飼料會降低畜禽生產水平，且長期使用容易導致動物中毒、結石等，給養殖戶造成巨大損失（範豔等，2019）。要從畜禽養殖源頭上檢測三聚氰胺。保障畜禽產品安全，為農業執法提供依據。目前還沒有國家標準的三聚氰胺檢測方法。農業行業標準是用氣質聯用法確診，用高效液相色譜法檢測。高效液相色譜法應用廣泛，基本上所有的化合物都可使用。氣相色譜-質譜法（GC-MS）需要衍生，影響效果和準確性。高效液相色譜-質譜法抗幹擾能力強，並且能夠確定性、定量，靈敏度高，準確性高。

4總結

綜上所述，本文研究采用高效液相色譜-質譜法檢測飼料和食品添加劑中的三聚氰胺。回收率為82%～99%，相對標準偏差1.6%～5.1%，靈敏度和準確度較好。高效液相色譜-質譜法處理簡單，操作性強，有利於三聚氰胺的檢測。

聲明：本文所用圖片、文字來源《中國飼料》2020年第18期，版權歸原作者所有。如涉及作品內容、版權等問題，請與本網聯係

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