(三)蒸餾法
蒸餾法是食品莉用被測物質中各種組分揮發性的不同進行分離的一種方法。該方法可以除去幹擾物質,检测技术基础也可以用於被測組分的知识蒸餾逸出,收集餾出液進行分析(如啤酒酒精含量的前处測定)。
1、食品常壓蒸餾
為一般蒸餾方式,检测技术基础多數沸點較高,知识熱穩定性好的前处成分可以采用這種方式。加熱方式可以根據蒸餾物的食品沸點和特性不同可以選擇水浴、油浴或直接加熱。检测技术基础
2、知识減壓蒸餾
某些被測物質熱穩定性差,前处容易分解或沸點過高,食品可以采用減壓蒸餾。检测技术基础減壓裝置可以采用水泵或真空泵。知识
3、水蒸氣蒸餾
某些物質沸點很高,直接加熱時,由於受熱不均勻會出現局部炭化或出現在沸點時發生分解,可以采用水蒸氣蒸餾(如啤酒中雙乙酰含量的測定、食醋中揮發酸含量的測定等)。
4、分餾
應用分餾柱將幾種沸點相近的混合物進行分離的方法稱為分餾。在分餾柱內,當上升的蒸氣與下降的冷凝液互相接觸時,上升的蒸氣部分冷凝放出熱量使下降的冷凝液部分氣化,兩者之間發生熱量交換,其結果,上升蒸氣中易揮發組分增加,而下降的冷凝液中高沸點組分(難揮發組分)增加,如此繼續多次,就等於進行了多次的氣液平衡,即達到了多次蒸餾的效果。這樣靠近分餾柱頂部易揮發物質的組分比率高,而在燒瓶裏高沸點組分(難揮發組分)的比率高。這樣隻要分餾柱足夠高,就可將這種組分完全徹底分開。
蒸餾和分餾的基本原理是一樣的,都是利用有機物質的沸點不同,在蒸餾過程中低沸點的組分先蒸出,高沸點的組分後蒸出,從而達到分離提純的目的。不同的是,分餾借助於分餾柱使一係列的蒸餾不需多次重複,一次得以完成(分餾即多次蒸餾);應用範圍也不同,蒸餾時混合液體中各組分的沸點要相差30℃以上才可以進行分離,而要徹底分離,沸點要相差110℃以上,而分餾可使沸點相近的互溶液體混合物(甚至沸點僅相差1~2℃)得到分離和純化。
5、掃集共蒸餾法
一種專用設備,管式蒸餾器後接冷凝裝置與微型層析柱。多用於測食品中殘存農藥的含量。特點:需樣量少,用注射器加料,節省溶劑,速度快,自動化式5~6s測一個樣,有20條淨化管道。
(四)溶劑提取法
1、浸提法
(1)溶劑分層法:在同一溶劑中,不同的物質具有不同的溶解度。利用樣品各組分在某一溶劑中溶解度的差異,將各組分完全或部分地分離的方法,稱為溶劑分層法。此法常用於維生素、重金屬、農藥及黃曲黴毒素的測定。
(2)浸泡法:用適當的溶劑將固體樣品中的某種待測成分浸提出來的方法稱為浸泡法,又稱液-固萃取法。
(3)索氏提取法:將一定量樣品放入索氏提取器中,加入溶劑加熱回流一定時間,將被測成分提取出來。此法溶劑用量少,提取完全,回收率高。但操作較麻煩,且需專用的索氏提取器。
2、溶劑萃取法
領用某組分在兩種互不相容的溶劑中分配係數的丕回,使其從一種溶劑轉移到另一種溶劑中,而與其他組分分離的方法,稱為溶劑萃取法。此法操作迅速,分離效果好,應用廣範。但萃取試劑通常易燃,易揮發,旦有毒性。
(1)萃取溶劑的選擇:萃取用溶劑應與原溶劑不互溶,對被測組分有最大溶解度,而對雜質有最小溶解度。即被測組分在萃取溶劑中有最大的分配係數,而雜質隻有最小的分配係數。經萃取後,被測組分進入萃取溶劑中,即同仍留在原溶劑中的雜質分離開。此外,還應考慮兩種溶劑分層的難易以及是否會產生泡沫等問題。
(2)萃取方法:萃取通常在分液漏鬥中進行,一般需經4~5次萃取才能達到完全分離的目的。當用比水輕的溶劑從水溶液中提取分配係數小或振蕩後易乳化的物質時,采用連續液體萃取器較分液漏鬥效果更好。
3、搗碎法
將切碎的樣品放入搗碎機中加溶劑搗碎一定時間,使被測成分提取出來。此法回收率較高,但幹擾雜質溶出較多。
一般來說,提取劑的提取效果符合相似相溶的原則,故應根據被提取物的極性強弱選擇提取劑。對極性較弱的成分(如有機氯農藥)可用極性小的溶劑(如正己烷、石油醚)提取,對極性強的成分(如黃曲黴毒素B)可用極性大的溶劑(如甲醇與水的混合溶液)提取。溶劑~沸點宜在45~80℃,沸點太低易揮發,沸點太高則不易濃縮,且對熱穩定性差的被提取成分也不利。此外,溶劑要穩定,不與樣品發生作用。
4、振蕩浸漬法
將樣品切碎,放在一合適的溶劑係統中浸漬、振蕩一定時間,即可從樣品中提取出被測成分。此法簡便易行,但回收率較低。
(五)鹽析法(沉澱反應)
向溶液中加入某種無機鹽,使溶質在原溶劑中的溶解度大大降低而從溶液中沉澱析出,稱為鹽析法。在試樣中加入適當的沉澱劑,使被測組分沉澱下來或將幹擾組分沉澱下來,再經過濾或離心把沉澱和母液分開。如在蛋白質溶液中加人大量鹽(如硫酸鈉、氯化銨等),特別是重金屬鹽 (堿性硫酸銅、堿性醋酸鉛等),使蛋白質從溶液中沉澱析出,分離沉澱後進行測定。
在進行鹽析時,應注意溶液中所要加入的無機鹽的選擇,要求其不能破壞溶液中要析出的物質,不然達不到鹽析提取物質的目的。
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