4、羧甲掃描電鏡形貌分析

用掃描電鏡觀察川木瓜多糖與羧甲基川木瓜多糖的基川外表形貌，實驗結果如圖6所示。木瓜a、多糖的制对αb是备及川木瓜多糖放大5×10³倍和10⁴倍的形貌，c、羧甲d是基川羧甲基川木瓜多糖放大5×10³倍和10⁴倍的形貌。在相同的木瓜放大倍數下對比a、c及b、多糖的制对αd，备及反應前後呈現出不同的羧甲形貌。川木瓜多糖的基川外麵光滑，表麵基本無孔洞，木瓜而羧甲基川木瓜多糖外表疏鬆多孔，多糖的制对α呈碎屑狀堆積，备及有明顯的溝槽結構。上述結果表麵羧甲基反應改變了原多糖的形貌及結構。

5、X-衍射分析

川木瓜多糖與羧甲基川木瓜多糖的X-衍射分析譜圖如圖7所示。從圖7可知川木瓜多糖與羧甲基川木瓜多糖均為衍射寬峰，無衍射銳峰，可以認定二者皆為無定型的結構。川木瓜多糖在衍射角為12^o和21^o分別有較大衍射強度，而羧甲基川木瓜多糖在衍射角為12^o處的衍射峰消失，隻剩12^o處的衍射峰，這是因為羧甲基引入川木瓜多糖中破壞了原多糖分子鏈中的氫鍵。

6、不同取代度羧甲基川木瓜多糖對α-葡萄糖苷酶的抑製作用

為了考察羧甲基川木瓜多糖對α-葡萄糖昔酶的抑製作用，從前麵的單因素和正交試驗中選取三組典型的呈梯度增長的1～3號羧甲基多糖。1號、2號、3號羧甲基川木瓜多糖的取代度分別為0.324、0.532、0.721。

不同取代度羧甲基川木瓜多糖對α-葡萄糖苷酶的抑製作用如圖8所示。從圖8可知，羧甲基川木瓜多糖對、阿卡波糖和原川木多糖均對α-葡萄糖苷酶有一定抑製作用，且抑製率隨濃度的增大而增強，即呈量效關係。1～3號羧甲基多糖對α-葡萄糖苷酶的抑製作用要強於原川木瓜多糖，說明羧甲基化能增強其抑酶活性。與陽性對照阿卡波糖相比，三種取代度的羧甲基多糖在低濃度範圍明顯弱於阿卡波糖，而中等取代度的多糖在濃度大於0.5mg·mL^-1後與阿卡波糖的抑製作用較接近。三種不同取代度的羧甲基多糖在濃度小於0.3mg·mL^-1時抑製作用沒有較大差異，當濃度增大後中等取代度的羧甲基多糖有較好的抑製效果，而高取代度和低取代的抑製效果較相當。取代度為0.532的羧甲基多糖當濃度為0.9mg·mL^-1時抑製率可達88.6％。由試驗結果可知，羧甲基川木瓜多糖的取代度對α-葡萄糖苷酶的抑製能力有一定的影響。多糖結構複雜，取代度對分子的結構產生了較大的影響，從而影響其抑製α-葡萄糖苷酶的活性，但取代度的大小也不是影響活性的唯一因素，可能與多種效應有關。

三、結論與討論

臨床上常用的口服降血糖藥物主要有硫脲類、雙胍類、苯甲酸衍生物類、噻唑烷二酮類和葡萄糖苷酶抑製劑類。α-葡萄糖苷酶抑製劑也已廣泛應用於臨床，主要有奧利司他、阿卡波糖、拜糖平等，但此類化學類降糖藥物有一定副作用，因此尋找高效低副作用的口服α-葡萄糖苷酶抑製劑成為醫藥研究領域的一個重要方向。

本研究通過化學修飾製備得羧甲基木瓜多糖，以取代度為工藝指標，通過單因素和正交試驗優化製備工藝，對羧甲基多糖分別進行紅外光譜、掃描電鏡、x一衍射表征，再測試不同取代度的羧甲基川木瓜多糖對僅一葡萄糖苷酶的抑製作用。

試驗結果表明，製備高取代度的羧甲基川木瓜多糖的最佳工藝條件為：NaOH濃度為4mol／L，氯乙酸用量為2g，反應溫度為60℃、反應時間3h，在該條件下取代度可達0.747。紅外光譜、掃描電鏡、X-衍射表征等表征手段均顯示川木瓜多糖已成功進行了羧甲基化修飾。羧基甲基修飾後的川木瓜多糖對α-葡萄糖苷酶的抑製作用強於原多糖，中等取代度的羧甲基川木瓜多糖抑酶活性比低、高取代度的作用要強。由此可知，取代度對α-葡萄糖苷酶的抑製能力有一定的影響，但並未找到最佳抑酶活性的取代度。取代度可能對多糖分子鏈構象、分子間距、分子量有較大影響，從而影響活性，其構效關係有待研究。

後續研究可以酶活抑製率作為指標，深入探討羧甲基方法、取代度等因素對抑製作用的影響，篩選出對α-葡萄糖苷酶具有較好抑製作用的羧甲基多糖。羧甲基川木瓜多糖對α-葡萄糖苷酶的抑製作用為體外試驗，其降血糖活性還需要體內降血糖模來一進步驗證。

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