二氧化硫或其衍生物（亞硫酸鹽、菠菜焦亞硫酸鹽、提取萄酒亞硫酸氫鹽）被廣泛地應用於葡萄的物去采摘、釀製過程中，除葡以起到保鮮、中亚殺菌、硫酸抗氧化、盐的研究穩定的菠菜作用。從古代起，提取萄酒人們便使用硫磺來為葡萄酒殺菌。物去歐盟法律規定幹紅葡萄酒中SO2的除葡總量上限為160mg/L，幹白和桃紅葡萄酒中SO2的中亚含量上限為210mg/L，澳大利亞為250mg/L～300mg/L，硫酸新西蘭為250mg/L～400mg/L。盐的研究美國食品藥品監督管理局（FoodandDrugAdministration，菠菜FDA）規定當葡萄酒中亞硫酸鹽含量超過10mg/L時，必須在標準中予以標明。我國對二氧化硫作為葡萄酒的添加劑，在使用量上也有嚴格的規定，作為添加劑的使用最高值為250mg/L，二氧化硫殘留量不得超過50mg/L。我國有機葡萄酒GB/T19630—2011《有機產品》中規定，紅葡萄酒的最大使用量為100mg/L，白葡萄酒、桃紅葡萄酒二氧化硫最大使用量為150mg/L。
葡萄酒中添加SO2，不但會影響葡萄酒的風味，而且也對人體健康不利，尤其對過敏體質者和哮喘病人會誘發一些身體問題聯合國糧食與農業組織和世界衛生組織聯合食品添加劑專家委員會製定的SO2安全攝入限量是每天每千克體重0.7mg。對於一個60kg的成年人，相當於每天攝入量不能超過42mg。針對葡萄酒中亞硫酸鹽的危害問題，Brown利用離子交換樹脂來吸附葡萄酒中的亞硫酸鹽，而Seifter等則采用含固定氧化劑的膜來去除葡萄酒中亞硫酸鹽，這兩種方法都能使葡萄酒中的亞硫酸鹽降到0.01mg/mL以下，但是由於其作用機製的非選擇性，結果會造成葡萄酒中一些成分的損失，從而影響葡萄酒的質量。Lin等利用從麥苗中提取的葉綠體對葡萄酒中的亞硫酸鹽清除情況進行了研究，結果發現該方法能夠有效地除去葡萄酒中的亞硫酸鹽，但是需要將葡萄酒的pH值調至8.5時，去除效率最好，而且該方法對白葡萄酒的處理效果要好於紅葡萄酒，同時發現光照對去除效果有一定的促進作用，顯然該方法存在一定缺陷。
亞硫酸鹽氧化酶能夠專一性將亞硫酸鹽氧化成硫酸鹽，但是由於這種酶的複雜性，目前還未有商業化生產。葉綠體作為一種天然的生物催化劑，存在於絕大多數的綠色植物葉片中。葉綠體在一定條件下通過代謝途徑對低濃度的亞硫酸鹽溶液具有良好的氧化並脫除的效果。本研究對從新鮮菠菜中提取的葉綠體內含物進行了改進，並對改進後的菠菜提取物去除葡萄酒中的亞硫酸鹽情況進行研究。
紅葡萄酒、白葡萄酒：煙台張裕葡萄酒有限公司；亞硝酸鈉、氫氧化鈉、氯化鈉、乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid，EDTA）、過氧化氫（以上試劑均為分析純）：國藥集團化學試劑有限公司。
ME204T/02電子天平：梅特勒-托利多公司；H1650-W台式離心機：湖南湘儀離心機有限公司；101型真空幹燥機：北京市永光明醫療儀器廠。
選取新鮮的嫩菠菜葉，洗淨，擦幹後去除葉梗，用高速組織破碎機破碎成勻漿，6層紗布過濾除去粗纖維，所得濾液於4℃、10000r/min離心10min，收集含葉綠體的內容物（線粒體、溶酶體、微體）的沉澱，真空幹燥、複配、密封、幹燥處保藏、備用。
按照國標GB/T15038—2006《葡萄酒、果酒通用分析方法》中SO2的測定方法進行測定。
分別取50mL葡萄酒置於250mL的三角瓶中，然後測定菠菜提取物在不同使用量、處理時間、pH值和酒精度等各種條件下二氧化硫的去除情況。其中，試驗過程中葡萄酒pH值的調整用0.1mol/L的氫氧化鈉進行，除非特別說明，所有試驗均在25℃室溫條件下進行。
在葡萄酒中二氧化硫去除單因素試驗的基礎上進行正交試驗設計，選取菠菜提取物用量0.3、0.4、0.5mg/mL；處理時間4、6、120min；pH值3.5、7.0、9.0；和乙醇濃度12.5%、22.5%、27.5%，為自變量，以1、2、3水平進行編碼，以總二氧化硫清除率為響應值進行四因素三水平試驗設計，試驗因素和水平設計見表1。
葡萄酒的感官品質包括葡萄酒的外觀、香氣、滋味以及是否具有典型性，因酒齡、品種、種植條件的不同，葡萄酒帶給人的感覺也千變萬化，本研究對去除二氧化硫後的葡萄酒進行感官評定，感官評分標準如表2所示。
所得數據利用正交設計助手II和SPSS21.0軟件進行單因素方差分析，P>0.05為差異不顯著；P＜0.05為差異顯著；P＜0.01為差異極顯著。
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