1、农药利用農藥分子的残留原有基因合成：利用--農藥分子中原有的活性基團，或經適當化學反應在農藥分子上形成-C1、酶的免-COCl、活性-OH、抑制疫分-NH2、免疫-CHO等活性基團，分析然後再與適當試劑縮合，技术如氨基酸與酰鹵或醛基、析法酸酐與羥基反應等，农药從而合成含適當長度“連接臂”的残留農藥半抗原。比如可在堿性條件下將噻菌靈分子中的酶的免氨基與溴代丙酸縮合，合成噻菌靈半抗原。活性
2、抑制疫分利用合成農藥的免疫中間體或農藥的降解產物(或結構類似物)合成：如克百威半抗原的合成，先用呋喃酚和光氣反應生成2，3-二氫-2，2-二甲基-7-苯並呋哺基氯甲酸酯，然後再和4-氨基丁酸或6氨基己酸反應得到保持克百威結構特征、具有羧基末端、含4個碳原子或6個碳原子“連接臂”的克百威半抗原。
3、從頭合成：如三唑磷半抗原的合成，以三氯硫磷為起始原料，先與乙醇反應生成二氯硫代磷酸乙酯，再先後與苯唑醇、氨基己酸(或氨基丁酸)反應得到三唑磷半抗原N-[(O-乙基-O-苯基-1，2，4-三唑)硫代磷酰基]-6-氨基己酸(或丁酸)。
農藥人工抗原的製備是指將農藥半抗原與載體蛋白共價耦聯的過程。製備人工抗原時應充分將農藥的特征結構突出於載體蛋白表麵。根據農藥半抗原中活性基團的不同，可采用不同的方法與載體蛋白共價耦聯。對於含活性羧基的農藥半抗原，通常采用活性酯法、碳二亞胺法或混合酸酐法與載體蛋白的遊離氨基形成酰胺鍵而共價耦聯。對於含脂肪族伯氨的農藥，通常通過戊二醛、二異氰酸酯、亞胺酸酯等連接劑與載體蛋白質共價耦聯。對於含芳香族伯胺(芳香族硝基可先還原為氨基)的農藥，可先反應生成重氮鹽，再與載體蛋白分子中酪氨酸殘基上酚羥基的鄰位形成偶氮鍵而共價耦聯。對於含羥基、氨基的農藥，可先與琥珀酸酐、氯乙酸鈉反應引入遊離羧基，再與載體蛋白質耦聯，對於含糖基的物質，分子中的鄰二醇可被過碘酸鹽氧化為醛基，再與載體蛋白質的遊離氨基形成酰胺鍵而共價耦聯。在製備人工抗原時，用於製備免疫原的載體蛋白和用於製備包被原的載體蛋白通常來自不同種屬，這樣可以在農藥免疫分析中減少抗體與蛋白質的非特異性反應。
1、多克隆抗體的製備多克隆抗體的製備用人工合成的免疫原免疫兔、羊等健康動物。
由於細菌、病毒等顆粒性抗原的免疫原性比人工抗原的免疫原性強，所以在用人工抗原免疫被細菌、病毒等病原物或寄生蟲感染的動物時，難以獲得對目標分析農藥具特異性親和力的抗體。
動物免疫方案：首次免疫以弗氏完全佐劑乳化免疫原使成油包水乳劑，用於皮內多點注射；加強免疫以弗氏不完全佐劑乳化免疫原使成油包水乳劑，用於皮內或皮下多點注射。免疫部位包括背部皮內和皮下、頸部皮下、腹腔、腳掌、腹股溝淋巴結等。未經佐劑乳化的水溶性免疫原，可進行肌肉注射或靜脈注射。按免疫劑量，動物免疫分微量法、常量法和大量法。微量法的免疫原劑量在微克(μg)級，常量法多為1～2mg/kg(體重)，大量法的免疫劑量為50～100mg/kg每隻動物；首次免疫的間隔時間一般3周左右，以後每隔7～10d加強免疫1次。4免後1周開始耳緣靜脈采血，室溫自然凝固後4℃放置過夜，分離血清。將抗血清按1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64……稀釋，瓊脂雙向免疫擴散法測定抗血清效價達1∶64時，頸動脈采全血，室溫自然凝固後4℃放置過夜。次日分離血清，加0.02％疊氮化鈉於一20℃分管凍存，可保存3～5年。也可采用硫酸銨三步鹽析法分離抗血清中的免疫球蛋白，必要時用免疫蛋白A或免疫蛋白G微球、離子交換柱色譜以及二乙胺乙基(DEAE)纖維素吸附法進一步純化，凍幹。抗體凍幹粉於-20℃可保存5～10年。
2、單克隆抗體的製備單克隆抗體的製備采用雜交瘤技術，具體步驟如下。
(1)動物免疫：用純化抗原對8～12周齡的BALB/c健康小鼠進行腹腔注射免疫(水溶性抗原需先用弗氏完全佐劑充分乳化)。通常共免疫5～8次，免疫問隔時問為2～3周。檢查抗血清的效價，末次免疫後3～4d，分離脾細胞。
(2)骨髓瘤細胞的培養：取Sp2/0骨髓瘤細胞株，先用含8-氮鳥嘌呤的培養基做適應培養，細胞倍增時間一般為10～15h，最高生長密度為9.0×105個/mL。在細胞融合前1d，用新鮮培養基調節細胞濃度為2.0×105個/mL，次日一般為對數生長期細胞。
(3)細胞融合：取具有高活性的骨髓瘤細胞和睥細胞按適當比例(一般1∶4)混合，加入聚乙二醇(PEG)使細胞彼此融合，然後用培養液稀釋以消除聚乙二醇的作用。將融合後的細胞適當稀釋後置培養板中培養。
(4)篩選：細胞培養至覆蓋l0％～20％培養板的孔底時，吸取上清液用間接酶聯免疫吸附測定法檢測抗體含量，篩選出抗體含量高的分泌孔。將孔中細胞再克隆化，而後用酶聯免疫吸附測定法進行抗原特異性測定，選出分泌特異性抗體的雜交瘤細胞株，液氮罐中凍存。
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