2.2食品樣品中測量OPEs的食品酸酯术淨化技術

在食品基質中痕量分析有機汙染物殘留時，常伴隨脂質以及其他有機物的中有阻燃幹擾，為消除該幹擾通常采用強酸或強堿對樣品進行處理，机磷剂检进展但OPEs在強酸堿條件下易降解，测技因此儀器分析之前采用合適的研究淨化方法成為必須。對食品基質提取液中OPEs淨化時，食品酸酯术常用Florisil、中有阻燃Al2O3、机磷剂检进展C18為填料的测技SPE柱，其中Florisil易從非極性基質中吸附極性化合物，研究Al2O3具相對溫和的食品酸酯术去脂能力，而C18對非極性和中等極性的中有阻燃組分均具有吸附作用。Santín等采用LC-MS/MS分析測定魚肉中16種OPEs，机磷剂检进展考察了5gFlorisil、测技中性Al2O3、研究堿性Al2O3分別與2gC18混合製備SPE柱的淨化效果，結果表明，5g堿性Al2O3和2gC18回收率為48%~113%，RSD<10%，而中性Al2O3和C18、Florisil和C18，回收率分別為23%~120%和1.6%~101%。Zhang等對常用的固體和液體食品分別進行MAE和UAE提取，均通過4gFlorisil、4g中性矽膠和2g無水硫酸鈉為填料的SPE柱淨化，選用甲醇和正己烷分別對所製備的SPE進行淋洗，上樣後用丙酮-乙酸乙酯(3∶7，v/v)洗脫，提取液經氮吹丙酮複溶後進行GC-MS/MS檢測，分析測定6種OPEs，獲得滿意回收率。

也有報道采用SPE技術結合d-SPE或GPC淨化技術，最大程度去除脂質及其他物質的幹擾。Liu等選用傳統的索氏技術提取後，將提取液分別經過OasisHLBSPE柱以及Z-Sep和C18混合分散固相萃取吸附劑進行兩步淨化，采用GC-MS對魚肉中12種OPEs進行測定，檢出限為0.004~0.059ng/g，回收率為56%~108%。Xu等將多種肉類食品提取液分別通過FlorisilSPE柱、C18和Z-Sep混合分散固相萃取吸附劑、丙氨基SPE柱多步淨化，有效去除脂質，降低了基質效應。采用GC-MS測定肉類樣品中OPEs，定量限為1.400~3.700ng/g，平均RSD值為7%。Ma等利用GC-MS方法測定家禽類食品中14種OPEs，通過MAE提取，將SPE和GPC淨化技術相結合，有效去除脂質並降低了共萃取物的幹擾。方法檢出限為0.006~0.021ng/g，回收率為70%~111%，重現性良好。

3分離與檢測技術

選擇合適的分離和檢測方法，可以降低相互幹擾和基質效應，進而提高檢測靈敏度和選擇性，實現食品中痕量OPEs的測定。以GC、LC為基礎的色譜分離、質譜及選擇性檢測器在食品中OPEs檢測中均有應用，如氣相色譜-電子轟擊源/化學電離源/負電子捕獲電離源-質譜(GC-EI/CI/ENCI-MS)、氣相色譜-串聯質譜、氣相色譜-高分辨質譜(GC-HRMS)、液相色譜-電噴霧電離源/大氣壓化學電離源-串聯質譜(LC-ESI/APCI-MS/MS)、超高效液相色譜-高分辨質譜(UPLC-HRMS)、氣相色譜-氮磷檢測器以及氣相色譜-火焰光度檢測器(GC-FPD)等。相關信息見表2，其中氣相色譜-質譜應用更為普遍，其方法檢出限和定量限相對於液相色譜-質譜低1~2個數量級。

3.1氣相色譜法

由於大部分OPEs具有一定揮發性，因此GC最常用，鑒於化合物具有較寬的極性和沸點範圍，(5%苯基)-甲基聚矽氧烷(DB-5MS)作為通用型色譜柱應用最廣，柱長從15~30m不等，常用規格為30m×0.25mm×0.25μm。Rodriguez等比較了相同規格(30m×0.25mm×0.25μm)的DB-5以及14%氰基-苯基-甲基-聚矽氧烷(SPB-1701)色譜柱對OPEs分離的影響。結果表明，SPB-1701色譜柱對互為同分異構體的TCPP和TCIPP分離效果較差，DB-5色譜柱分離TBOEP和TPHP受溫度影響大導致選擇性較差。通過優化實驗條件，確定起始溫度在50℃保持1min，以15℃/min升至260℃保持10min，進樣量1μL，不分流進樣，進樣口和檢測器溫度分別為270℃和320℃，使用GC-NPD對水樣中OPEs分析測定。方法檢出限為4μg/mL，線性相關係數為0.9970，RSD為2%~3%。

使用GC-MS測定OPEs時，常用EI源、CI源、ECNI源。其中EI源具有較高的電離效率，通過豐富的碎片離子以及較完善的譜圖庫，利於結構鑒定。Gustavsson等比較了GC-EI-MS、GC-CI-MS、GC-EI-MS/MS3種檢測方法，GC-EI-MS對OPEs定性選擇能力較強。Ma和Hites等比較了EI源、ECNI源、正化學電離(PCI)源3種電離源對13種OPEs裂解規律、定量及定性能力。結果表明，根據化合物結構，EI源主要產生H4PO+4、[M-Cl]+、[M-CH2Cl]+或[M]+離子碎片;ECNI源通常生成碎片[M-R]-;PCI源主要產生質子化的分子離子碎片[M+H]+。當選用EI源作電離源時應注意，對於大多烷基類和鹵化類的OPEs均會生成m/z99的質子化磷酸基團H4PO+4，該基團沒有保留任何OPEs斷裂丟失基團的信息，選該基團作為定量離子時同位素稀釋質譜法將不再適用。因此在定量分析時，應盡量選取m/z99以外的其他特征離子，這也使得分析測定OPEs具有一定難度。

在分析基質複雜的食品時，GC-MS/MS相對於GC-MS表現出更好的選擇性、準確度以及更低的定量限。Poma等利用QuEChERS結合SPE前處理方法和GC-EI-MS/MS檢測技術，以TCEP-d12、TDCIPP-d15、TPHP-d15作為內標，測定雞蛋、魚肉、穀物、土豆等多種食品中14種OPEs，方法的定量限達到0.001~61.970ng/g，並表現出較好的回收率。Liu等等使用索氏提取，OasisHLBSPE柱和Z-Sep-C18(質量比1∶1)多步淨化，以TnPP-d21、TnBP-d27、TCPP-d18、TPHP-d15為內標，GC-EI-MS/MS同時測定魚肉中12種OPEs，檢出限為0.005~0.810ng/g。

3.2液相色譜法

LC-MS/MS測定沸點高、不易揮發、相對分子質量大的OPEs具有較高的靈敏度，但卻常伴隨基質效應以及分離困難等不足。LC分離OPEs通常選用C18或C8為固定相色譜柱(UPLCBEHC18、LunaC8、WatersXteraC18等)，甲酸水溶液、甲醇、乙腈或其混合溶液作為梯度洗脫流動相，大多選用正離子模式、電噴霧電離(ESI+)源，並結合多反應監測(MRM)模式進行信息采集。

Ding等采用QuEChERS前處理方法，以WatersBEHC18柱(100mm×2.1mm，1.7μm)作分析柱，0.1%甲酸水溶液和乙腈溶液作流動相，UPLC-MS/MS(ESI+)方法測定了蔬菜、牛奶、穀物等食品中10種OPEs，方法檢出限為0.020~0.240ng/g，定量限為0.050~0.420ng/g，回收率為73%~106%;OPEs在食品中總含量為1.100~9.600ng/g，穀物中OPEs的殘留量相對較高，其中TEHP含量最高。Tokumura等比較了GC-EI-MS、GC-NCI-MS、LC-ESI-MS/MS、LC-APCI-MS/MS4種檢測技術分析14種OPEs純品，研究發現LC-ESI-MS/MS和LC-APCI-MS/MS(0.810~970pg)的定量限比GC-EI-MS和GC-NCI-MS(2.300~3900pg)低1~2個數量級。Chen等利用LC-ESI-MS/MS測定了鯡鷗蛋中12種OPEs，優化條件下基質效應為86%~99%，定量限為0.060~0.200ng/g。Han等分析肉類和魚類樣品，GC-MS/MS和UPLC-MS/MS分別測定8種和14種OPEs化合物。除TiBP和TnPP外，GC-MS/MS定量限更低;兩種方法測定大多OPEs的基質效應均在±20%範圍內，但UPLC-MS/MS測定鮭魚中OPEs時，基質抑製效應明顯，為40%~79%。

聲明:本文所用圖片、文字來源《色譜》2020年12月，版權歸原作者所有。如涉及作品內容、版權等問題，請與本網聯係 

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