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三种方法测定液体型保健食品中苯甲醇的含量(一)

来源:时间:2025-04-22 20:42:56

液體型保健食品包括口服液、种方中苯飲料、法测保健酒等品種,定液的含由於含糖類或蛋白質等營養物質,体型在生產和貯藏過程中易氧化變質或受微生物汙染而敗壞,保健因此,食品通常會添加適量的甲醇防腐劑達到延長保質期的目的。苯甲酸、种方中苯山梨酸、法测對羥基苯甲酸酯類等為常用的定液的含防腐劑,但在實驗中發現,体型部分口服液型保健食品中加入了苯甲醇,保健可能作為香料添加,食品也可能為了達到防腐抑菌的甲醇效果。

苯甲醇是种方中苯藥用輔料,收載於美國FDA《非活性物質指南》中,是藥膏或藥液中常用的抑菌劑,一般用量為1~2%。苯甲醇在體內主要由肝髒代謝,易被氧化成苯甲醛和苯甲酸,已有動物毒理實驗證明,苯甲酸的口服LD50為1250~1996mg/kg(鼠),苯甲醇的口服LD50為1580mg/kg(鼠),二者具有接近的LD50值,說明苯甲醇具有與苯甲酸類似的毒性。2019年12月1日起施行的《保健食品備案產品可用輔料及其使用規定(2019年版)》中規定,苯甲酸及其鈉鹽在液體製劑中的最大使用量為1g/kg,未列出苯甲醇及其使用規定。在GB2760-2014《食品安全國家標準食品添加劑使用標準》中,苯甲醇為允許使用的食品合成香料,是否可用作食品防腐劑未作規定。國外對於食品中苯甲醇、苯甲酸、苯甲酸鹽等多類苄基化合物的總使用限值有明確要求,1996年FAO/WHO食品添加劑聯合專家委員會(JECFA)規定食品添加劑中苯甲酸(JECFAnumber850)、苯甲酸鹽、苯甲醛(JECFAnumber22)、苯甲酸乙酯(JECFAnumber23)、苯甲醇(JECFAnumber25)和苯甲酸苄酯(JECFAnumber24)最高每日允許攝入量(ADI)為0~5mg/kg體重(以苯甲酸當量計),並在2001年第57次JECFA會議中保持了這一結論。

近年來,對於苯甲醇的研究多集中在生產工藝和在藥品領域的應用上,針對保健食品中苯甲醇含量測定的報道不多,國家尚未頒布食品中苯甲醇的測定方法,可見,建立保健食品中苯甲醇的含量測定方法,對於加強保健食品中食品添加劑的監控,保障食品安全,具有十分重要的意義。本研究以液體型保健食品為研究對象,建立了氣相色譜、高效液相色譜和氣相色譜-質譜聯用三種苯甲醇的測定方法,並比較了三種方法的優缺點和適用範圍,希望能夠為建立苯甲醇測定的標準方法、製定合理的限值範圍提供參考依據。

一、實驗部分

1、氣相色譜法

(1)溶液的製備

精密稱取苯甲醇對照品50mg置於50mL量瓶中,加無水乙醇稀釋並定容,得對照品儲備液。取樣品混勻,精密稱取1.0g,置於10mL量瓶中,加無水乙醇溶解並超聲提取10min,冷卻至室溫後定容,0.22μm濾膜濾過,得樣品溶液。

(2)色譜條件

色譜柱:J&WDB-WAX(60mx0.25mmx0.25μm),升溫程序為初始溫度150℃,10℃/min升到180℃,保持3min,20℃/min升到230℃,保持5min;載氣為氮氣,恒流速度1.0mL/min,分流比10:1,檢測器溫度250℃,進樣口溫度240℃,進樣量1μL。

2、高效液相色譜法

(1)溶液的製備

精密稱取苯甲醇對照品25mg置於10mL量瓶中,加50%甲醇溶液稀釋並定容,得對照品儲備液。取樣品混勻,精密稱取1.0g置於25mL量瓶中,加適量50%甲醇溶液超聲提取10min,冷卻至室溫後定容,0.22μm濾膜濾過,得樣品溶液。

(2)色譜條件

色譜柱:AgilentZORBAXEclipseXDB-C18(4.6x250mm,5μm),流動相為甲醇(A)-20mmo/L乙酸銨溶液(B),梯度洗脫(0~8min,10%A;8.1~20min,30%A;20.1~30min,10%A),流速為1.0mL/min,進樣量為10uL,柱溫為35℃,檢測波長為210nm。

3、氣相色譜-質譜法

(1)溶液的製備

對照品儲備液同氣相色譜法項下儲備液。取樣品混勻,精密稱取1.0g,置於10mL量瓶中,加無水乙醇溶解並超聲提取10min後定容,0.22μm濾膜濾過,精密量取續濾液0.1mL置於10mL量瓶中,加無水乙醇定容,得樣品溶液。

(2)色譜與質譜條件

色譜條件:色譜柱為J&WDB--624UI(60mx0.25mmx1.4μm),升溫程序為初始溫度60℃,保持1min,以50℃/min升溫至150℃,保持2min,再以10℃/min升溫至250℃,保持26min;載氣為氦氣,初始流量1mL/min,保持20min,以2mL/min升至2mL/min,保持20min,進樣口溫度250℃,分流比10:1,進樣量1μL。

質譜條件:傳輸線溫度260℃,離子源溫度280℃,離子化方式EI,電子能量70eV,延遲時間7.3min,檢測方式為全掃描(m/z30~300)和SIM選擇離子監測模式(定量離子79.0m/z,定性離子107.0m/z和108.0m/z)。

二、結果與討論

1、係統適用性

苯甲醇在GC、HPLC、GC-MS三個係統上的色譜圖見圖1~圖3。樣品在目標峰位置無雜質幹擾。另外,考察了山梨酸、苯甲酸和苯甲醇三種組分的混合溶液在三個係統中的分離效果,結果分離度均大於1.5,滿足係統適用性的要求。

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