通過16S測序結果的比對分析確定該菌為腐敗希瓦氏菌。以這株水產品腐敗希瓦氏菌的品腐基因組DNA為模板，用相應引物對冷激蛋白基因進行PCR擴增，败希白然後用2%的瓦氏瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴增產物，結果如圖1所示。菌冷激蛋结构PCR擴增產物的分析長度在500bp左右，與預期的水产產物大小相符。將PCR產物送至上海生工測序，品腐並將測序序列用ORFFinder軟件和Blast分析。败希白使用ORFFinder軟件的瓦氏結果表明，克隆的菌冷激蛋结构基因片段都有完整的開放閱讀框（ORF），3個冷激蛋白基因Csp1589，分析Csp1376和Csp2252的水产ORF長度分別為210，210，品腐207bp，败希白起始密碼子為ATG，終止密碼子為TAA，分別編碼69，69，68個氨基酸。Blast結果表明，水產品腐敗希瓦氏菌的3個冷激蛋白基因與腐敗希瓦氏菌模式菌株的3個冷激蛋白基因的序列相似性均達100%，說明冷激蛋白高度保守。
使用MEGA7.0軟件構建腐敗希瓦氏菌和大腸杆菌的冷激蛋白的係統發生樹，結果如圖2所示。水產品腐敗希瓦氏菌的冷激蛋白基因Csp1589和Csp1376與大腸杆菌的冷激蛋白基因CspA聚類在同一類群，表明它們之間的有較高的相似性和較近的親緣關係。大腸杆菌CspA為主要的冷誘導蛋白，低溫下大量表達。初步推測Csp1589和Csp1376在腐敗希瓦氏菌對低溫脅迫的適應中起關鍵作用。腐敗希瓦氏菌的冷激蛋白基因Csp2252與大腸杆菌的冷激蛋白基因CspD位於同一分枝，大腸杆菌CspD在營養缺乏時大量表達並能結合單鏈DNA，從而抑製染色體的複製，因此腐敗希瓦氏菌的冷激蛋白基因Csp2252可能與細胞生長分化有關。
利用ProtParam預測腐敗希瓦氏菌冷激蛋白的基本生理、生化特征，結果見表2。預測的腐敗希瓦氏菌冷激蛋白是由68～69個氨基酸殘基構成，分子質量在7.4ku左右的小分子蛋白，且其帶負電荷的氨基酸的量大於帶正電荷氨基酸的量，即酸性氨基酸的量大於堿性氨基酸的量，PＩ小於7，說明這些蛋白質都是酸性蛋白質，符合CSPs的特點。蛋白質的總平均親水性為負數，說明測定的蛋白皆為親水性蛋白。由不穩定係數可知，除Csp2252外，蛋白質在體外的穩定性都較好，在大腸杆菌體內的半衰期大於10h。PSORT預測腐敗希瓦氏菌冷激蛋白皆定位於細胞質。TMHMM預測結果顯示腐敗希瓦氏菌冷激蛋白均不存在α螺旋跨膜，是非跨膜蛋白。SignalＩP預測結果表明腐敗希瓦氏菌冷激蛋白不存在信號肽，不能分泌到胞外。推測腐敗希瓦氏菌的3個冷激蛋白均為非分泌型、非跨膜蛋白，冷激蛋白在腐敗希瓦氏菌細胞質中合成後不進行蛋白轉運，而是保留在細胞基質中發揮作用。
將腐敗希瓦氏菌冷激蛋白的氨基酸序列提交至CDservice，檢測結果顯示：腐敗希瓦氏菌的冷激蛋白Csp1589、Csp1376和Csp2252都具有DNA結合位點和RNA結合基序，且同屬於類S1總科。類S1總科是一類包含與核糖體蛋白S1的RNA結合結構域相似的結構域的蛋白合集。這種結構最初在S1核糖體蛋白中被發現，目前已在多種RNA相關蛋白中被發現
SMART預測結果表明：腐敗希瓦氏菌的3個冷激蛋白都包含冷休克結構域（Coldshockdomain，CSD），冷休克結構域屬於類S1總科這個超級家族，且其從原核生物到高等真核生物高度保守，具有RNA分子伴侶功能。包含冷休克結構域的蛋白可以參與多種細胞生理生化過程，包括對低溫的適應、營養脅迫、細胞生長和發育過程等。此外，由圖3可知腐敗希瓦氏菌的冷激蛋白Csp1589和Csp1376屬於保守蛋白結構域家族CspC，是冷誘導蛋白，因此推測Csp1589和Csp1376與細菌對低溫的適應性有關；而腐敗希瓦氏菌Csp2252不屬於CspC家族，其可能參與其它的細胞過程，這個結果與上述係統發生樹的結果一致。
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