稱取已知含量的咖啡川芎生品粉末(CX-SP)9份,每份約1.5g,酸和酸为素精密稱定,阿魏每3份為一組,指标制因分別精密加入對照品咖啡酸、从不川芎阿魏酸的同炮探究量相當於川芎粉末中兩種成分含量的80%、100%、角度酒炙机理120%,咖啡製備供試品溶液,酸和酸为素計算加樣回收率,阿魏結果見表1。指标制因
稱取不同的从不川芎川芎樣品各3份,每份約3.0g,同炮探究精密稱定。角度酒炙机理按供試品製備方法製備樣品並測定,咖啡記錄峰麵積,計算川芎樣品中咖啡酸和阿魏酸的含量,結果見表2。
將黃酒潤製後炮製不同時間和水潤製後炮製不同時間的川芎中咖啡酸和阿魏酸的含量分別進行比較,如圖2所示。將炮製前後咖啡酸和阿魏酸的含量變化及機理從加熱因素、炒製時間和炮製輔料三方麵解釋:(1)加熱因素,黃酒悶潤的川芎經炒製不同時間後,其所含咖啡酸及阿魏酸的含量均比沒有經過加熱炒製即黃酒潤製後直接自然晾幹的川芎高,且均比川芎生品高。
(2)炒製時間,黃酒悶潤的川芎中咖啡酸和阿魏酸的含量隨炒製時間延長均有升高趨勢,二者均在炒製20min時含量最高,之後逐漸降低,二者的變化趨勢相近。(3)輔料影響,黃酒悶潤的川芎樣品中咖啡酸和阿魏酸的含量均比川芎生品高。
不同濃度“醇炙”川芎樣品中咖啡酸和阿魏酸的含量變化如圖3所示。由圖可知,川芎經不同濃度乙醇悶潤炒製20min後,咖啡酸和阿魏酸的含量均比相同濃度乙醇悶潤後自然晾幹的川芎樣品高,含量增高的原因為加熱炒製。不同濃度“醇炙”後,川芎樣品中兩種成分的含量與生品相比,幾乎沒有顯著變化。在炒製時間同為20min時,酒炙川芎樣品中咖啡酸和阿魏酸的含量顯著高於不同濃度“醇炙”川芎樣品,其中阿魏酸含量比與黃酒含醇量相近的10%“醇炙”川芎高出近一倍。此外,不同濃度乙醇悶潤川芎樣品之間咖啡酸和阿魏酸的含量變化均不顯著。
黃酒中除含有一定量的乙醇外,水分的含量較高,因此文章設計了蒸餾水潤製,與黃酒潤製進行對照。結果發現,蒸餾水潤製之後炒製10,15,20min的川芎樣品中兩種成分的含量均較生品高,也高於不同濃度乙醇潤製後炒製20min的川芎樣品。由上可知,與川芎生品相比,酒炙後咖啡酸和阿魏酸含量的顯著升高可能不是黃酒中含有乙醇和水的原因。
酚酸類化合物是川芎中重要的一類化學成分,具有很多生物活性,本課題組前期指紋圖譜研究發現川芎酒炙後阿魏酸含量明顯升高,並且阿魏酸是中國藥典中川芎質量控製的指標成分。與阿魏酸的結構相近,咖啡酸也是川芎中的一種酚酸類成分,並且為阿魏酸的生物合成前體。本研究以咖啡酸和阿魏酸為含量測定指標,通過改變不同炮製因素來探討川芎酒炙機理。
有研究者認為黃酒中的乙醇可以提高某些成分的溶出而增強藥效,本實驗所用黃酒含有12%的乙醇,考慮到乙醇可能會影響酒炙後咖啡酸和阿魏酸的含量,故本研究采用不同濃度的乙醇在與製備酒炙川芎相同的條件下炮製川芎飲片,文章中簡稱為“醇炙”川芎。
從含量測定結果可以看出,酒炙川芎樣品中咖啡酸和阿魏酸的含量均比黃酒潤製後不經過加熱炒製而直接自然晾幹的川芎樣品高,說明加熱是影響兩成分含量變化的重要因素。隨炒製時間的延長,酒炙川芎中咖啡酸和阿魏酸的含量變化趨勢大體一致,均有升高趨勢,且炒製20min時含量最高,之後含量又隨之降低,說明炒製時間不是越長越好,20min為最佳炮製時間。
乙醇為黃酒中的主要組成成分,考慮到不同黃酒含有不同濃度的乙醇,本研究製備了不同濃度乙醇炮製的“醇炙”川芎樣品,其咖啡酸和阿魏酸含量與生品相比均無明顯增加,且不同濃度乙醇炮製的“醇炙”川芎樣品之間兩種成分的含量變化也不顯著,說明黃酒中的乙醇對川芎中咖啡酸和阿魏酸含量的影響較小。此外,本實驗所用黃酒含醇量為12%,故將黃酒悶潤炒製20min和10%乙醇悶潤炒製20min的川芎進行比較,發現酒炙川芎樣品中咖啡酸和阿魏酸的含量均顯著高於“醇炙”川芎。
水也為黃酒中的主要組成成分,用蒸餾水悶潤川芎並分別炒製5、10、15、20min,兩成分的含量和生品相比均有所升高。炒製20min時,兩成分的含量均高於不同濃度乙醇悶潤後炒製20min的“醇炙”川芎樣品,但略低於黃酒悶潤後炒製20min的酒炙川芎樣品。
傳統理論認為,酒炙增強功效的原因在於黃酒中的乙醇可以起到對有效成分增溶的作用。本研究發現酒炙確實可以增高川芎中咖啡酸和阿魏酸的含量,但可能並不是由於黃酒中含有乙醇。僅用蒸餾水潤製之後進行炒製,咖啡酸和阿魏酸的含量同樣也能增加,且比采用不同濃度乙醇悶潤的“醇炙”樣品含量高,其原因可能為生川芎飲片中依然存在一部分沒有失去活性的酶,水分的引入,文火的加熱,使這些酶依然可以將阿魏酸從纖維素結構中水解,從而使阿魏酸含量增高。
綜上所述,加熱、炒製時間和輔料黃酒均是影響酒炙川芎的重要因素,且文火炒製20min為最佳炮製時間。酒炙川芎中阿魏酸的含量比“醇炙”和水潤炒製品均高,其原因,經查閱文獻,發現黃酒本身也含有少量的阿魏酸,故川芎酒炙增效的原因可能來源於黃酒和川芎中阿魏酸量的疊加。此外黃酒中含有大量的氨基酸和酯類物質,是否這些物質的共同作用是“酒炙增效”的原因還需要進一步進行實驗探索。
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