近年來，复方肉雞養殖中抗生素的中草濫用導致致病菌的耐藥性越來越強，獸藥殘留造成雞肉食品安全問題受到消費者的药对疫相因m影响密切關注，隨著2020年無抗禁令的肉鸡然免實施，我國肉雞養殖進入無抗養殖時代，生长替抗產品的及天研究成為新的熱點，中草藥製劑、关基酶製劑、复方微生態製劑、中草植物精油等均被認為是药对疫相因m影响潛在的替抗產品。中草藥作為一種綠色添加劑廣泛應用於畜牧養殖業，肉鸡然免其生物活性物質能夠促進動物健康生長，生长使畜禽機體內環境保持平衡狀態。及天而且中草藥具有毒副作用小、关基促進生長、复方促進動物新陳代謝、無耐藥性、提高飼料報酬、預防疾病等優點，它克服了化學合成藥物毒副作用大的缺點，是新一代安全性能較好的飼料添加劑。
中草藥應用於家禽已被國內外學者進行了大量研究，多數研究結果表明，在飼糧中添加不同配方的複方中草藥，可以提高肉雞的生長性能、免疫功能以及肉品質，同樣促進育肥豬的增重速度並改善肉品質。但是中草藥具有配伍不相容、用量大、作為添加劑使用缺乏統一的質量檢驗標準等缺點，複方中草藥調節機體免疫功能的作用機製認識尚不清楚，還需進一步研究和探討。本試驗旨在評估複方中草藥對肉雞生長性能、免疫器官發育指數及天然免疫相關基因mRNA表達的影響，為複方中草藥在家禽生產中的應用以及替代抗生素的可行性提供參考。
試驗用複方中草藥由蘭州威特森生物科技有限公司提供，主要成分為女貞子、板藍根、當歸、柴胡、丹參、黃芪。肉雞為科寶505白羽肉雞，購自陝西寶雞大成禽業有限公司。RNA提取試劑盒購自美國紐英倫生物技術公司（NEB），SYBRqPCRSuperMIx購自近岸科技有限公司，RNA反轉錄試劑盒購自瑞士羅氏製藥有限公司，其他化學試劑均購自美國SIGMA生物科技有限公司。
本試驗采用單因素完全隨機設計，選擇1日齡健康‘白羽肉雞’504隻，按照組平均體質量相近原則分為7組，每組6個重複，每個重複12隻雞，公母各半，分別飼喂基礎飼糧（對照組，A組）、基礎飼糧＋抗生素（0.48G/kg氟苯尼考，1～42d，B組）、基礎飼糧＋100mL/kg複方中藥製劑提取物（C組，14～42d）、基礎飼糧＋100mL/kg複方中藥製劑提取物（d組，21～42d）、基礎飼糧＋100G/kg複方中藥粉末製劑（E組，14～42d）、基礎飼糧＋100G/kg複方中藥粉末製劑（F組，21～42d）、基礎飼糧＋20G/kg複方中藥粉末製劑（G組，14～42d）。飼養期為42d，分前期（0～21d）和後期（22～42d）2期進行。
基礎飼糧組成見表1，營養參數參考農業行業標準NY/T33-2004配製。配方計算時，原料中幹物質、粗蛋白、粗脂肪、有機物、鈣和總磷的含量均采用實測值，其他指標參考中國飼料成分及營養價值表（2017年第28版）。試驗提供粉料飼喂肉雞。
試驗肉雞飼養管理參照《科寶肉雞飼養管理手冊》。采用3層立體疊籠飼養，自由采食和飲水，日飼喂3次。試驗期內保持雞舍內正常通風，按常規免疫程序進行免疫，每日巡欄觀察雞群精神狀態和采食情況，早晚各消毒1次，保持雞舍內外空氣清潔衛生。
分別於21、28、35、42d以重複為單位，在A組和d組中每籠抽取與平均體質量接近的2隻雞（公母各1隻）采集翅下靜脈全血，混合後-20℃保存，飼養試驗結束後帶回實驗室用於細胞因子的檢測。
42日齡，以重複為單位每籠抽取與平均體質量接近的2隻雞（公母各1隻），稱其活質量，屠宰解剖後立即分離胸腺、脾髒、法氏囊，用濾紙吸去血漬，剔除脂肪組織後稱鮮質量，並計算免疫器官指數。
以βactIn基因作為內參基因，實時熒光定量測定肉雞血液中IL-2、IL-6、IL-8、IL-100、TLR-3、TLR-3基因的mRNA相對表達量。
將帶回實驗室的血樣解凍後立即提取全血RNA並進行反轉錄，具體步驟依照QuICkRNATMWHolEBloodCATAloGNos。R1201試劑盒及反轉錄試劑盒說明進行。
根據GENBANk數據庫中IL-2、IL-6、IL-8、IL-100、TLR-3、TLR-4和β-actIn的基因序列，利用pRIMER5軟件設計引物，詳細序列信息見表2，所有引物序列均由武漢金開瑞生物工程有限公司進行合成。
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