（7）DPPH自由基清除力測定

根據DPPH與乙醇溶液顯色，响应性研當有抗氧化劑存在時，面法使DPPH乙醇溶液顏色消退，优化從而導致吸光強度發生改變的超声方法測定DPPH自由基清除能力。參照Sun等的辅助實驗方法並做適當修改。分別精確配製0.125mg/mL、桦剥化活0.25mg/mL、管菌0.5mg/mL、多糖1.0mg/mL、及其究1.5mg/mL、抗氧2.0mg/mL樣品多糖溶液，响应性研用95％乙醇溶液配製0.2mmol/LDPPH溶液，面法依次在反應體係中加入2.0mLDPPH乙醇溶液(0.2mmol/L)和2.0mL不同濃度的优化多糖溶液。將反應體係混勻，超声在室溫下靜置30min，辅助在517nm處測定各反應液的吸光值。空白組的多糖溶液由95％乙醇溶液代替。對照組用同等濃度的VC溶液代替多糖溶液。按照下式計算DPPH自由基的清除率。

DPPH自由基清除率(％)=(Ao-A)/Ao×100％，其中，Ao：空白組的吸光值；A：樣品組的吸光值。

二、結果與分析

1、葡萄糖標準曲線的建立

以葡萄糖含量為橫坐標，對應吸光值為縱坐標，建立標準曲線，得到線性標準曲線回歸方程(如圖2)：

2、樺剝管菌多糖提取的單因素實驗

（1）水浴溫度對樺剝管菌多糖得率的影響

從圖3可以看出，水浴溫度在40℃～70℃範圍內時，隨著水浴溫度的增高，樺剝管菌多糖得率不斷增加，當水浴溫度達到70℃時，多糖得率最大，在水浴溫度進一步增高時，多糖得率有所降低。當溫度較低時，多糖的溶解與滲透能力較低，樺剝管菌多糖不易有效溶出。當溫度較高時，高溫“崩解”細胞並增強分子熱運動，促使部分多糖鏈降解更易溶出。但當溫度過高時，又會破壞多糖成分，引起多糖降解，從而導致提取率的下降。因此選擇水浴溫度60、70、80℃進行響應麵優化實驗分析。

（2）超聲溫度對樺剝管菌多糖得率的影響

從圖4可以看出，樺剝管菌多糖得率隨著超聲溫度的升高，呈現出先升後降的趨勢，超聲溫度在70℃時，多糖得率最大，為7.28％，但與其他超聲溫度影響下的多糖得率相差不大，因此不選擇超聲溫度進行後續的響應麵優化實驗分析。

（3）超聲時間對樺剝管菌多糖得率的影響

從圖5可以看出，超聲時間在10～30min範圍內時，隨著超聲時間的增加，樺剝管菌多糖得率為6.24％～6.99％，變化不明顯，與其他因素相比較，超聲時間影響較小，因此不選擇超聲時間進行響應麵優化實驗分析。

（4）超聲功率對樺剝管菌多糖得率的影響

從圖6可以看出，超聲功率在60～100W的範圍內，樺剝管菌多糖得率變化較明顯，當超聲功率在80W時，其多糖得率達到相對最大值，超聲功率也是影響多糖得率的因素之一，多糖得率在超聲功率為90W時下降可能是由於超聲波過強的剪切力和衝擊波對多糖分子有所破壞，導致多糖得率有所降低。因此選擇超聲功率70、80、90W進行響應麵優化實驗分析。

聲明：本文所用圖片、文字來源《中國食品添加劑》，版權歸原作者所有。如涉及作品內容、版權等問題，請與本網聯係

相關鏈接：自由基，乙醇，葡萄糖