2.3 培養條件對解澱粉芽孢杆菌F3菌株纖維素酶活性的株高影響

2.3.1 培養時間的影響

F3菌株經LB液體培養基活化後，按4%接種量接種至LB液體培養基，产纤产酶37℃連續培養72h，维素不同時間點的解淀菌分纖維素酶活性結果如圖5所示。

由圖5可知，粉芽隨著培養時間的孢杆延長，F3菌株纖維素酶活性呈上升趨勢，离及48h時酶活性最高，优化纖維素酶活力為15.97U/mL，条件隨後纖維素酶活性呈下降趨勢，株高故最佳培養時間確定為48h，产纤产酶這不同於其他研究報道中芽孢杆菌纖維素酶活力最佳培養時間3d～4d。维素

2.3.2 培養溫度的解淀菌分影響

活化的F3菌株按4%接種量接種至LB液體培養基，不同培養溫度下F3菌株纖維素酶活力的粉芽變化結果如圖6所示。隨著溫度的孢杆升高，F3菌株產纖維素酶的活力呈先上升再下降的趨勢，其中仍以37℃培養溫度條件下酶活力最高，但35℃與37℃兩種培養溫度對F3菌株纖維素酶活力的影響差異不顯著（p＞0.05），其產纖維素酶的最佳培養溫度與其他研究報道的解澱粉芽孢杆菌存在較大差異，說明溫度對解澱粉芽孢杆菌纖維素酶活力的影響具有明顯的菌株特異性。

2.3.3 接種量的影響

F3菌株經活化後，分別按不同接種量接種至LB液體培養基中37℃培養48h，纖維素酶活力檢測結果如圖7所示。接種量為6%時，F3菌株的纖維素酶活力最高為17.62U/mL，但與4%接種量時其酶活力差異不顯著（p＞0.05），這與其他研究報道類似。

2.3.4 培養基初始pH對F3菌株纖維素酶活性的影響

活化的F3菌株分別按6%接種量接種至不同初始pH的LB液體培養基中，37℃培養48h，纖維素酶活力檢測結果如圖8所示。

由圖8可知，培養基初始pH對F3菌株產纖維素酶的活力影響顯著，其中以初始pH為pH7.0時纖維素酶活力最高，達18.22U/mL，明顯高於其它初始pH時菌株所產的纖維素酶活力（p＜0.05）。此外，從不同初始pH條件下菌株的生長狀況看，初始pH為pH11.0時，F3菌株的培養液相對澄清，這說明F3菌株不適宜在pH11.0的堿性條件生長，這也導致了此條件下其產酶能力最弱。相比於pH7.0條件，F3菌株在pH3.0的酸性條件下長勢也不強，但仍具有一定的酶活性，而何頌捷等報道的解澱粉芽孢杆菌在pH3.0的初始pH下不能生長，故無纖維素酶活性。由此說明，F3菌株更適宜在中性條件下生長。

2.4 解澱粉芽孢杆菌F3產纖維素酶條件優化

根據單因素試驗結果，按照表1中選取的因素及水平，進行正交試驗優化，結果如表2所示。4種因素對F3菌株產纖維素酶活力的影響大小順序依次為：培養基初始pH＞培養時間＞培養溫度＞接種量，纖維素酶活力優化的最佳組合為A₂B₂C₂D₃。按照最佳組合的培養條件進行培養，即LB液體培養基的初始pH調至pH7.0，按6%接種量接種F3菌株，在37℃培養溫度下連續培養60h，解澱粉芽孢杆菌F3菌株培養液中纖維素酶活力可達21.14U/mL，相比於正交試驗優化前最高酶活提高了16.03%。F3菌株所產纖維素酶的活力明顯高於林曉瓊等報道的解澱粉芽孢杆菌，具有潛在的應用價值。

3 結論

從自然界中挖掘具有纖維素酶活性的微生物菌種資源具有重要意義。文中從發酵豆豉中分離到一株可產纖維素酶的解澱粉芽孢杆菌植物亞種F3菌株，通過單因素及正交試驗優化了其液體培養的最佳產酶條件，即培養溫度37℃、接種量6%、初始pH為pH7.0、發酵時間60h，纖維素酶活力可達21.14U/mL。

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