2、海洋菌株MCDA02的细菌酰酶鑒定菌株MCDA02為革蘭氏陰性短杆菌(圖2b)，無芽孢。丁质該菌株在LB固體培養上培養48h後：黃色，脱乙条件不透明，发酵表麵光滑濕潤，优化圓形，海洋邊緣齊整，细菌酰酶中心稍突起，丁质易挑取(圖2a)。脱乙条件該菌株明膠酶、发酵吲哚試驗、优化硫化氫產生、海洋VP試驗、细菌酰酶硝酸鹽還原試驗、丁质尿素酶、檸檬酸鹽均呈陰性，氧化酶、接觸酶試驗均為陽性(表1)。菌株MCDA0216SrDNA序列提交GenBank(登錄號：MH454348)，BLAST比對後發現菌株MCDA02與Microbacteriumesteraromaticum的同源性最高。利用MEGA9.0軟件通過鄰接法構建係統發育樹(圖3)，菌株MCDA02與Microbacteriumesteraromaticum親緣關係最近，將菌株MCDA02鑒定為Microbacteriumesteraromaticum。目前尚未見酯香微杆菌產幾丁質脫乙酰酶的報道。

3、發酵培養基成分對菌株MCDA02發酵產CDA的影響

（1）發酵培養基碳源對菌株MCDA02產酶的影響

碳源對菌株MCDA02發酵產酶的影響如圖4，所選的8種不同的碳源中，木薯澱粉為碳源時該菌株產酶最高，其次為乳糖，其相對酶活也達到了70％以上，玉米澱粉相對酶活最低僅有10％。因此最終選用木薯澱粉作為發酵培養基的碳源。

（2）發酵培養基氮源對菌株MCDA02發酵產CDA的影響

氮源對菌株MCDA02生長的影響如圖5，所選的11種不同的氮源中，添加蛋白腖時該菌株產酶最高，其次為玉米漿，其相對酶活也達到75％以上，而其餘氮源相對酶活均為達到70％。因此最終選用蛋白腖作為發酵培養基的氮源。

（3）發酵培養基無機鹽對菌株MCDA02發酵產CDA的影響

無機鹽對菌株MCDA02生長的影響如圖6，所選的9種不同的無機鹽中，添加ZnSO4時該菌株產酶最高，緊接著是KH2PO4，其相對酶活達75％以上，添加CuSO4時相對酶活最低，不足25％。因此最終選用ZnSO4為配製發酵培養基所用無機鹽。

4、發酵條件對菌株MCDA02發酵產CDA的影響

（1）發酵時間對菌株MCDA02發酵產CDA的影響

發酵時間對菌株MCDA02生長的影響如圖7，發酵時間在36h～48h時，產酶量顯著增加。發酵時間處於48h～72h之間時，產酶量增長速度減緩。發酵時間達到72h時產酶量達到最高點，發酵72h後菌株MCDA02產酶量開始下降。

（2）發酵溫度對菌株MCDA02發酵產CDA的影響

發酵溫度對菌株MCDA02生長的影響如圖8，在30℃時菌株MCDA02產幾丁質脫乙酰酶的量最高。溫度超過30℃時，菌株的產酶量迅速下降，溫度到達40℃時，菌株MCDA02的相對酶活低至10％左右。

（3）發酵培養基起始pH對菌株MCDA02發酵產CDA的影響

發酵培養基起始pH對菌株MCDA02生長的影響如圖9，隨著發酵培養基初始pH的升高，菌株產酶能力隨之提升，pH為8.0時，產酶量達到最高。pH繼續升高，菌株MCDA02產酶量降低，pH為10.0時，菌株MCDA02相對酶活低至20％以下。
 

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