②料液比對苦養蛋白和黃酮類化合物超聲同步提取的超声影響
隨著液料比的增大,苦養蛋白和黃酮類化合物得率也隨之增大。辅助當液料比達到30∶mL/g時,苦荞苦蕎蛋白得率達到最大值為8.04%,中蛋黃酮類化合物得率為1.18%。白和步提隨著液料比的黄酮繼續增加,黃酮得率逐漸增大且趨勢平緩,取工而苦蕎蛋白得率逐漸減小。超声由於液料比過大使提取液濃度過低,辅助在酸沉過程中溶液中的苦荞蛋白和黃酮類化合物易流失在上清液中,甚至導致酸不沉析的中蛋現象產生。從耗能等綜合角度考慮,白和步提液料比以30∶mL/g為宜。黄酮
③pH對苦養蛋白和黃酮類化合物超聲同步提取的取工影響
在堿性條件下超聲同步提取苦蕎蛋白和黃酮類物質,隨著pH的超声增大二者的得率也隨之增大,說明堿性條件有利於苦養蛋白和黃酮類物質的溶出。當pH為9時,蛋白得率達到最大值7.89%,黃酮得率最大值1.12%。但隨著pH的繼續增大兩者的得率均呈下降趨勢。這是因為苦蕎蛋白在強堿環境下會產生水解、脫氨以及脫羧等反應,影響理化性質,破壞蛋白質結構,導致蛋白質強烈變性。pH過高也會影響產品色澤以及出現其他副作用,在酸沉過程中也會使溶液中鹽分增加,發生鹽溶現象。考慮到生產成本以及環保等因素,選用pH為9的溶液進行苦蕎蛋白和黃酮類物質的最佳提取條件。
④時間對苦蕎蛋白和黃酮類化合物超聲輔助同步提取的影響
隨著超聲時間的延長,苦蕎中蛋白和黃酮類物質的得率隨之增加。表明在一定的時間範圍內,超聲作用可使細胞破裂進而促進蛋白的釋放,進而增加蛋白得率。當超聲時間達到40min時苦蕎蛋白的得率達到最大值,隨後呈下降趨勢,因為長時間的高溫及強堿作用會使蛋白質結構破壞,溶解度降低。黃酮類物質得率一直為增長趨勢,時間達到60min後增長趨勢緩慢,但時間過長會導致雜質的溶出。故選擇40min為最佳提取條件。
⑤溫度對苦蕎蛋白和黃酮類化合物超聲輔助同步提取的影響
當超聲溫度達到65℃時,苦蕎蛋白和黃酮類化合物得率均達到最大值,分別為7.97%和1.19%。隨著溫度繼續升高,會使蛋白結構破壞甚至變性,雖然溫度的升高促使分子解吸,加快擴散速度,從而提高黃酮得率,但過高的溫度容易使黃酮被氧化,也會導致黃酮類化合物的某些部位位置發生變化,母核被破壞,使其得率呈下降趨勢。因此提取溫度為65℃最為適宜。
(2)響應麵優化試驗
以Box—Benhnken的中心組合試驗設計原理為依據,根據單因素試驗結果,選擇粒度(A)、pH(B)、溫度(C)進行三因素三水平響應麵設計同步提取苦蕎中蕎麥蛋白和黃酮類物質。因素編碼水平表見表2,試驗設計及結果見表3。
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