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相溶解度法研究环糊精对二氢黄酮苷的增溶作用(一)

来源:时间:2025-04-22 02:17:11

二氫黃酮苷又名橙皮苷、相溶柚皮苷,解度究环是法研一種黃酮類衍生物,其具有維持血管正常滲透壓、糊精黄酮抗氧化、对氢降血脂、增溶作用抗炎、相溶抗癌抗腫瘤等生理功效,解度究环在功能性食品、法研化妝品及醫藥等領域具有巨大的糊精黄酮應用價值;但是二氫黃酮苷難溶於水,這極大地限製了其應用範圍。对氢環糊精分子呈現出中空的增溶作用錐形環狀結構,具有外親水內疏水的相溶優良特性,這主要歸因於環糊精分子外部含有較多的解度究环極性羥基和內部分子內腔由於C-H鍵屏蔽而呈現出的疏水性。環糊精在食品領域有著廣泛地應用,法研其可以作為主體分子包合疏水性客體分子,形成穩態結構,從而提高客體分子的溶解度和穩定性等理化性質,起到保護、穩定藥物分子的作用。為了改善二氫黃酮苷的溶解性,提高其穩定性及活性效率,擴大二氫黃酮苷功效成分的使用範圍,製備不同用途的二氫黃酮苷功能性食品及藥品,本文采用相溶解度法研究了常用環糊精對二氫黃酮營的包合作用、增溶作用以及包合過程有關熱力學參數的變化,為二氫黃酮苷的開發利用及微膠囊化奠定基礎。

一、材料與方法

1、材料與試劑

二氫黃酮苷、α-環糊精(α-CD)、β-環糊精(β-CD)、),γ-環糊精(γ-CD)、甲基-β-環糊精(M-β-CD)、2-羥丙基-β-環糊精(HP-β-CD)、麥芽糖基-β-環糊精(Mal-β-CD),上海阿拉丁生化科技股份有限公司;羥乙基-β-環糊精(HE-β-CD),上海源葉生物科技有限公司;甲醇,西隴科學股份有限公司,分析純。

2、儀器與設備

AL204電子分析天平:梅特勒一托利多儀器(上海)有限公司;UV-2600PC紫外/可見光分光亮度計:島津企業管理(中國)有限公司;QYC一200全溫培養搖床:上海新苗醫療器械製造有限公司。

3、實驗方法

(1)標準曲線的繪製

以甲醇做溶劑,配製濃度為100mg/L的二氫黃酮苷溶液作為儲備液,置於棕色試劑瓶中低溫下保存。分別吸取二氫黃酮苷儲備液0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、5.0mL於7個10mL的比色管中,用甲醇定容至刻度,配製濃度為4~50mg/L的溶液。在波長284am處測定紫外吸光度,繪製標準曲線。

(2)不同環糊精濃度下的二氫黃酮苷的增溶試驗

用蒸餾水做溶劑,分別配製濃度0、2、4、6、8mmol/L的7種環糊精溶液各5mL,加入過量的二氫黃酮苷於上述溶液中,分別在30℃、40℃、50℃避光條件下置於搖床中振搖48h,設置轉動速度為200r/min,二氫黃酮苷溶解達平衡後,用孔徑為0.45μm的針筒過濾器過濾,將濾液稀釋一定倍數後測定284nm處的紫外吸光度,通過二氫黃酮苷的標準曲線得出二氫黃酮苷的含量。

二、結果與分析

1、二氫黃酮苷的標準曲線

按以甲醇做溶劑,配製濃度為100mg/L的二氫黃酮苷溶液作為儲備液,置於棕色試劑瓶中低溫下保存。分別吸取二氫黃酮苷儲備液0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、5.0mL於7個10mL的比色管中,用甲醇定容至刻度,配製濃度為4~50mg/L的溶液。在波長284am處測定紫外吸光度,繪製二氫黃酮營的標準曲線如圖1所示,由圖1可知,該標準曲線的回歸方程:y=0.0322x+0.0425,R2=0.9994;由此可推斷出在4~50mg/L濃度範圍內,二氫黃酮苷的濃度與吸光度具有良好的線性關係。

2、相溶解度曲線

按用蒸餾水做溶劑,分別配製濃度0、2、4、6、8mmol/L的7種環糊精溶液各5mL,加入過量的二氫黃酮苷於上述溶液中,分別在30℃、40℃、50℃避光條件下置於搖床中振搖48h,設置轉動速度為200r/min,二氫黃酮苷溶解達平衡後,用孔徑為0.45μm的針筒過濾器過濾,將濾液稀釋一定倍數後測定284nm處的紫外吸光度,通過二氫黃酮苷的標準曲線得出二氫黃酮苷的含量。計算不同溫度下不同濃度環糊精溶液中的二氫黃酮苷含量,通過二氫黃酮苷與環糊精濃度的對應關係,選擇合適的橫縱坐標,繪製不同溫度下的相溶解度曲線,結果如圖2~4所示。當不添加環糊精時,二氫黃酮苷在水中的溶解度很小。在30℃、40℃、50℃條件下二氫黃酮苷的溶解度均隨環糊精及其衍生物的濃度的增加而增加,這表明不同溫度下環糊精及其衍生物均增加了二氫黃酮苷在水中的溶解度,且增溶作用明顯。由圖2~4可知,甲基-β-糊精增溶效果最顯著,α-環糊精對二氫黃酮苷的溶解度影響很小,幾乎不起增溶效果;γ-環糊精、β-環糊精及其衍生物濃度與二氫黃酮苷溶解度之間呈現線性相關,說明二氫黃酮苷與這6種環糊精1:1進行包合。

3、環糊精/二氫黃酮苷包合常數的測定

包合常數K是主客體相互作用中的重要參數,與包合物性質密切相關,通過其數值可以判斷環糊精與難溶性物質包合時相互作用力的大小,因此包合常數的測定在表征包合物性質時具有十分重要的意義。通過AL型相溶解度圖得到的線性方程,結合K=斜率/[So×(1-斜率)](So:二氫黃酮苷在水中的固有溶解度),可以計算出K值,結果見表1。

根據二氫黃酮苷在不同濃度下的包合常數K,結合方程:

可計算出熱力學參數△G。由方程式(1)和式(2)可得:

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