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超声波辅助提取会理石榴皮中总黄酮的工艺研究(一)

来源:时间:2025-04-22 02:29:24

石榴(Punicagranatum)屬石榴科植物,超声是波辅中國的特色果品,因適應性強、助提中总好管理,理石榴皮在我國中部、黄酮東部、艺研西部地區均有栽培。超声石榴皮中含有很多具有營養價值和藥物價值的波辅有效成分,如生理活性十分廣泛的助提中总黃酮類化合物、多元酚類化合物鞣質、理石榴皮生物堿類有機化合物和一些酸性有機化合物的黄酮多種有效成分。黃酮類化合物的艺研生理活性十分廣泛,具有抑菌、超声抗炎、波辅降血壓等多種在醫學上十分重要的助提中总功能,特別是具有抗自由基、抗癌、防癌的作用,使得黃酮類化合物在醫學、保健食品、天然食品添加劑,特別是天然的抗氧化劑的研究和應用上有著十分重要的地位。近年來,黃酮的需求量越來越大,不同的學者從很多類型的原材料上提取黃酮類化合物,但是已研究與開發的黃酮類產品仍屬極少數。黃酮類產品具有非常大的市場需求空間。超聲提取技術主要是利用超聲波的空化作用加速植物細胞中有效成分的溶出,超聲波提取具有省時、節能、提取率高等優點,在工業生產上已經有比較普遍的應用。

四川的攀西會理地區,擁有十分豐富的石榴資源,當地獨特的南亞氣候使該地區的石榴獨一無二。在對石榴進行加工的同時,會留下大量的石榴皮。隨著會理石榴銷售量的日益增加,石榴副產物也在日益增加。這些遺留下來的石榴皮不僅造成了巨大的資源浪費,而且給環境帶來嚴重威脅。本試驗以四川會理石榴皮作為研究材料,采用超聲波輔助提取工藝,研究石榴皮中總黃酮的最佳提取工藝,以期為四川攀西地區石榴皮的精深加工提供理論依據。

二、材料與方法

1、材料與試劑

試驗所用石榴采自四川會理。蘆丁化學對照品(標準品,成都瑞芬思生物科技有限公司);亞硝酸鈉(分析純,成都市科龍化工試劑廠);硝酸鋁(分析純,科龍化工試劑廠);氫氧化鈉(分析純,成都市科龍化工試劑廠)。

2、儀器

電熱恒溫鼓風幹燥箱(上海躍進醫療器械有限公司);萬分之一電子天平;XL-10B500克密封型搖擺式粉碎機(廣州市旭朗機械設備有限公司);KH3200V型超聲波清洗器(昆山禾創超聲儀器有限公司);TDL-6A離心機(上海菲恰爾分析儀器有限公司);L2S可見光分光光度計(上海儀電分析儀器有限公司)。

3、試驗材料的處理

將會理石榴手工剝皮,將皮切碎成小顆粒(約0.5×0.5×0.5cm大小),置於白色磁盤中鋪平,放入70℃的恒溫鼓風幹燥箱中幹燥至全幹。用超微粉碎機將石榴皮粉碎,過60目篩,將石榴皮細粉末裝入不透光的密封樣品袋中,存放在幹燥器中待用。

4、標準曲線的繪製

精確稱取蘆丁化學對照品20mg,用濃度為30%的乙醇溶液將其溶解、定容於50mL容量瓶中,充分搖勻,最終得到濃度為0.4mg/mL的蘆丁標準溶液,避光保存待用。

精確吸取上述配置好的蘆丁標準溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL,分別置於10mL試管中,分別加入30%乙醇至5mL,編號為1、2、3、4、5、6。再各加入5%的NaNO2溶液0.3mL,混勻,無顏色變化,靜置6min,然後分別加入0.3mL10%的Al(NO33溶液,搖勻,靜置6min。再分別加入4%的NaOH溶液1mL,搖勻,顏色加深,最後用30%乙醇溶液稀釋至刻度,靜置20~25min,並於30min後在蘆丁的最大吸收峰510nm處測定光密度值。

5、黃酮類化合物的提取方法

精確稱取過篩後的會理石榴皮粉0.5000g於25mL比色管中,加入一定濃度的乙醇提取液,搖勻,密封。在一定溫度下(且需保持此溫度)進行超聲波提取一段時間後取出。將超聲處理後的樣品靜置冷卻至室溫,然後進行過濾,取濾液2mL於25mL比色管中,加入對應乙醇溶液至10mL,加入5%NaNO2溶液0.6mL,搖勻後靜置6min,然後分別加入0.6mL的10%的Al(NO3)3溶液,搖勻後靜置6min後加入4%的NaOH溶液2mL,搖勻後用對應乙醇溶液稀釋至20mL,靜置20~25min後,以5000r/min的速度離心8min後在510nm下測定其吸光值,以對應乙醇溶液作為空白對照。

6、提取率的計算方法

根據標準曲線,得出蘆丁含量,按下式求出樣品中的黃酮含量。

式中:X—樣品總黃酮提取率;

m1—被測溶液的總黃酮含量,mg;

m—試樣的質量,g;

v1—待測液分取的體積,mL;

v2—待測液的總體積,mL;

注:結果精確至小數點後2位。

二、結果與分析

1、標準曲線

按精確稱取蘆丁化學對照品20mg,用濃度為30%的乙醇溶液將其溶解、定容於50mL容量瓶中,充分搖勻,最終得到濃度為0.4mg/mL的蘆丁標準溶液,避光保存待用。按照這個的方法,繪製蘆丁標準曲線如圖1。運用最小二乘法經線性回歸,求出蘆丁濃度與吸光度值關係曲線的回歸方程y=0.1194x-0.0005,R2=0.9995,說明蘆丁在此範圍內具有良好的線性關係。

2、不同乙醇濃度對石榴皮總黃酮提取率的影響
 

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