本文采用高效液相色譜法測定含乳飲料中的含乳乙酰磺胺酸鉀，對《飲料中乙酰磺胺酸鉀的饮料优化測定》(GB/T 5009.140—2003)中的檢測方法進行改進。結果表明，中乙改進後的酰磺方法在5.197 5～127.74 0μg/mL範圍內，相關係數為0.999，胺酸平均回收率為91.77%～99.46%，钾的检测RSD為0.8%～1.9%；方法檢出限為3.8μg/g；檢測結果與國家標準方法檢測的含乳結果相近。由此可見，饮料优化該方法具有較高的中乙可靠性和準確性。
乙酰磺胺酸鉀又名安賽蜜，酰磺為人工合成甜味劑，胺酸易溶於水，钾的检测難溶於乙醇等有機溶劑，含乳在空氣中不吸濕，饮料优化對熱、中乙酸穩定，是目前世界上穩定性最高的甜味劑之一。乙酰磺胺酸鉀可與其他甜味劑混合使用，適用於烘烤食品、酸性飲料及供糖尿病人的食品和低能量食品中。
安賽蜜在1983年被FAO/WHO聯合食品添加劑專家委員會列為A級食品添加劑，並推薦日均攝入量為0～15 mg/kg。安賽蜜在人體內不代謝、不積蓄，100%以原形物質從尿中排出體外。在GB 2760—2014中，對於飲料類，乙酰磺胺酸鉀的限值為0.3g/kg。
市售乳飲料，4份；甲醇，色譜純；乙腈，分析純；乙酰磺胺酸鉀標準品，純度99.0%，Dr.Ehrenstorfer GmbH。乙酰磺胺酸鉀標準貯備液：稱取純度為99%的乙酰磺胺酸鉀標準品10.50 mg到10.00 mL容量瓶，用水定容至刻度，搖勻，配製成濃度為1.039 5 mg/mL的溶液。亞鐵氰化鉀溶液(92 g/L)：稱取92 g亞鐵氰化鉀，加入適量水溶解，用水定容至1 000 mL。乙酸鋅溶液：稱取22.0 g乙酸鋅溶於少量水中，加入30 mL冰乙酸，用水定容至100 mL。10%硫酸溶液：量取10 mL濃硫酸，慢慢用水定容至100 mL。其餘有機試劑均為國產分析純。
1290液相色譜儀，美國安捷倫科技有限公司；AllegraX-15R離心機，美國貝克曼公司；CPA2250電子分析天平，賽多利斯科學儀器(北京)有限公司；VXR振蕩器，德國IKA公司。
色譜柱：JADE-PAK ODS-AQ 3.5μm 100 mm×2.1 mm；流動相：0.02 moL/L乙酸銨-甲醇(90∶10)；流速：0.40 mL/min；柱溫：35℃；檢測波長：214 nm；進樣量：1μL。
取樣品2.50 g，加水約20 mL搖勻後，離心15 min，待水溶液流至柱表麵時，用0.02 mol/L硫酸銨-甲醇-乙腈-10%硫酸洗脫。收集洗脫液25 mL，搖勻，經0.22μm微孔濾膜過濾，進高效液相色譜儀分析。
取樣品2.50 g至50 mL離心管，加水20 mL，加入乙酸鉛2 mL和亞鐵氰化鉀2 mL，用水定容至25.0 mL，振蕩離心3 min，取上清液5.00 mL至15 mL離心管中，再加入1.00 mL10%硫酸和5.00 mL乙腈，振蕩2 min，離心3 min，上清液乙腈層經0.22μm微孔濾膜過濾，進高效液相色譜儀分析。
取市售的某4種含乳飲料，編號分別為T1、T2、T3和T4。稱取這4種樣品各2.50 g(精確到0.01 g)，每份樣品稱取2份，並按照GB/T 5009.140—2003的方法進行檢測，得到結果：T1為125 mg/kg，T2為138 mg/kg，T3為230 mg/kg，T4未檢出。
稱取4份T4樣品各2.50 g，編號為T4-ADD-1、T4-ADD-2、T4-ADD-3和T4-ADD-4加入乙酰磺胺酸鉀標準溶液0.80 mL，餘下步驟按照GB/T 5009.140—2003的方法測定乙酰磺胺酸鉀的含量，回收率分別為90.8%、92.2%、91.9%和95.6%，平均回收率為92.6%。
精密吸取乙酰磺胺酸鉀標準貯備液0.10 mL、0.20 mL、0.30 mL、0.40 mL、0.60 mL和1.20 mL分別至不同的20.00 mL容量瓶，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，配製成濃度為5.197 5μg/mL、10.395μg/mL、20.790μg/mL、41.580μg/mL、62.370μg/mL和127.74μg/mL的標準係列溶液。結果表明，乙酰磺胺酸鉀在5.1975～127.74μg/mL濃度範圍內線性關係良好。
取濃度為62.370μg/mL的乙酰磺胺酸鉀標準溶液，按照改進方法連續進樣5次。得到5次乙酰磺胺酸鉀的響應值，其響應值的相對標準偏差為0.6%，小於2%，表明該方法精密度良好。
取編號為T1、T2、T3、T4的4批含乳飲料，按改進方法進行檢測，結果：T1為132 mg/kg，T2為132 mg/kg，T3為220 mg/kg，T4未檢出。檢測結果表明，用國家標準方法檢測的結果與改進方法檢測的結果相近。
稱取T3樣品2.50 g(精確到0.01 g)共9份，編號分別為A、B、C、D、E、F、G、H、I。其中A、B、C樣品加入乙酰磺胺酸鉀標準溶液0.40 mL；其中D、E、F樣品加入乙酰磺胺酸鉀標準溶液0.80 mL；其中G、H、I樣品加入酰磺胺酸鉀標準溶液1.20 mL，然後按改進方法進行檢測。結果表明，該方法的回收率在91.71%～99.46%，RSD為0.8%～1.9%，說明該方法的結果穩定，數據可靠。
不稱取樣品溶液，餘下步驟按改進方法操作。結果顯示，空白試驗無幹擾，對檢測結果沒有影響。
稱取6份T1樣品各2.50 g，編號分別為T1-1、T1-2、T1-3、T1-4、T1-5和T1-6，按照改進方法操作，6份樣品響應值分別為：134.1 mg/kg、131.1 mg/kg、131.5 mg/kg、129.3 mg/kg、134.2 mg/kg和134.3 mg/kg，乙酰磺胺酸鉀含量平均值為132 mg/kg，RSD為1.6%。結果表明，該改進方法的重現性好，結果穩定。
取T4樣品2.50 g，加入0.15 mL濃度為62.370μg/mL的乙酰磺胺酸鉀標準液，然後按改進方法操作，得到檢出限溶液，按1.3.1中色譜條件進行測定，得到乙酰磺胺酸鉀的信噪比為7，檢出限為3.8μg/g，優於GB/T 5009.140—2003中4μg/g的檢出限值。
在改進方法探究中，可先用水稀釋樣品，再利用亞鐵氰化鉀溶液和乙酸鋅溶液反應產出沉澱的原理除去含乳飲料中的蛋白質，然後利用2 g無水硫酸鎂和0.5 g氯化鈉、10%硫酸和乙腈進行富集、淨化，從而促使操作簡單化。
本文采用的改進方法通過用水稀釋樣品，用蛋白質沉澱劑除去含乳飲料中的大量的蛋白質。利用乙酰磺胺酸鉀呈弱酸性的特點，在酸性條件下，抑製乙酰磺胺酸鉀電離，並且利用乙腈和飽和鹽溶液分層的特點，從而得到乙腈層。高速離心讓水相乙腈層更好的分層，從而對樣品進行淨化，並把乙腈層過濾，上機測定。
結果表明，改進後的方法在5.197 5～127.74 0μg/mL範圍內，相關係數為0.999，呈良好的線性關係；精密度與重現性的RSD均小於2%，滿足國家標準的要求；平均回收率為91.77%～99.46%，RSD為0.8%～1.9%；方法檢出限為3.8μg/g，優於國家標準4μg/g；市售的4批含乳飲料通過改進方法與國家標準方法檢測相比，結果相近，精密度均小於國家標準10%的要求。由此可見，該方法有較高的可靠性和準確性。
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