選擇丹磺酰氯作為衍生劑，其添加量優化結果見圖1。生物色谱在丹磺酰氯添加量5～10mg/mL範圍，高效隨著添加量的液相增加，各生物胺的分析法峰麵積增加；當丹磺酰氯添加量大於等於10mg/mL時，各生物胺峰麵積不再隨其添加量的白酒增加而增加，基本保持不變，和黄表明所衍生的酒中生物胺達到飽和狀態。選取10mg/mL的生物色谱丹磺酰氯溶液作為本試驗的衍生試劑。
比較ThermoHypersilGOLDC18柱（柱長250mm，柱內徑4.6mm，分析法柱填料粒徑5μm）與島津InertsilODS-4C18柱（柱長150mm，白酒柱內徑4.6mm，柱填料粒徑5μm）對各生物胺的分離效果。經250mm色譜柱分離後，9種生物胺在37min內彼此分離且峰形對稱。經150mm色譜柱分離後，37min內色譜圖中隻有8種生物胺的流出峰，無法在37min內分離9種生物胺。
流動相A與B的比例見表1。通過不斷調整流動相A與B的含量，得到最優洗脫程序方案2。采用方案2對9種生物胺混標溶液進行洗脫分離，各生物胺流出峰彼此分離效果較好。
比較萃取處理對生物胺含量檢測的影響。方案1直接對生物胺衍生，而方案2在對生物胺衍生之前進行萃取富集處理。選取屍胺、鹽酸吡哆胺與β-苯乙胺3種生物胺，比較萃取處理對生物胺檢測效果的影響，結果見表2。分析可知，對生物胺萃取處理後再衍生，生物胺損失程度減小，在樣品複雜的基質中對生物胺的檢測效果更佳，這說明對樣品進行萃取、淨化的重要性。
按照所建立的方法，將配製好的梯度係列標準溶液（50.00，25.00，5.00，1.00，0.50，0.25，0.20，0.10，0.05mg/L）進行線性試驗。對標準溶液濃度（X）對其峰麵積（Y）進行回歸方程線性擬合，通過R2進行相關性評價。9種生物胺的檢出限（LOD）與定量限（LOQ）通過3倍信噪比（S/N=3）與10倍信噪比（S/N=10）計算，結果見表3。優化的色譜條件程序洗脫後，混標中各生物胺色譜峰圖如圖1所示，各生物胺加標黃酒樣品中的色譜峰圖如圖2所示。
由表3可知，9種生物胺在0.5～50mg/L質量濃度範圍，該方法具有良好的線性關係，相關係數R2均大於0.998。檢出限範圍0.07～0.22mg/L，定量限範圍0.07～0.73mg/L。分析圖1與圖2後發現37min洗脫與分離後，9種混合生物胺色譜峰先後流出，被成功分離。
選取3種生物胺做加標回收試驗，向黃酒樣品中加入3種濃度水平的混合標準溶液，加標量分別為1.0，5.0，10.0mg/L，其濃度均在線性範圍。用所建立的方法進行前處理與測定，各加標水平樣品平行測定3份，結果見表4。3種生物胺加標回收率在83.30%～114.70%之間，相對標準偏差（RＳD）均低於4.56%，說明該方法對生物胺的檢測結果較為準確，重複性好。
用所建立的方法分析黃酒與白酒中生物胺含量，結果見表5和表6。由表5可知，黃酒中含有8種生物胺，總含量為29.39mg/L，各生物胺含量均有差異。色胺與屍胺為該黃酒樣品中的主要生物胺，含量分別為（18.06±0.012）mg/L與（4.28±0.059）mg/L，β-苯乙胺含量為（1.21±0.021）mg/L，腐胺含量為（2.15±0.002）mg/L，鹽酸吡哆胺含量為（2.45±0.028）mg/L，組胺含量為（0.40±0.049）mg/L，酪胺含量為（0.75±0.003）mg/L，亞精胺含量為（0.09±0.003）mg/L，精胺未檢出。白酒檢測結果見表6。白酒中生物胺總含量在3.83～7.94mg/L之間，其中組胺在4種白酒中被檢出，精胺隻在一種白酒中檢出，其餘7種生物胺在5種白酒中均被檢出。比較黃酒與白酒中各生物胺含量可以發現，黃酒中的生物胺總含量高於白酒。這與之前研究報道一致。雖然二者均采用釀造工藝，但是後期工藝不同，黃酒無需蒸餾處理，而白酒需蒸餾處理，蒸餾後酒體中生物胺含量大大減少。另外，催化氨基酸脫羧轉變成生物胺的脫羧酶，在pH4.04～4.33的黃酒釀造過程中被誘導合成，導致黃酒中生物胺含量相對較多。
采用HPLC-紫外檢測法，丹磺酰氯柱前衍生梯度分離洗脫黃酒與白酒中的生物胺，在37min內實現了兩種酒體中9種生物胺的分離。比較分析黃酒與白酒中生物胺含量，結果該方法準確性好，可快速檢測9種生物胺含量。
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