②對亞油酸過氧化的陈皮抑製作用
洗脫物1～6用無水乙醇溶解，首先確定各洗脫物的抗油飽和濃度，為了便於比較，脂氧將六種洗脫物統一配製成較小飽和濃度值的化活貯備液，為4.05mg／mL。性成以維生素C做陽性對照，分研清除DPPH活性測定提取物1、陈皮2和3用無水乙醇溶解，抗油提取物4用蒸餾水溶解，脂氧首先確定各提取物的化活飽和濃度，為了便於比較，性成將四種提取物統一配製成較小飽和濃度值的分研儲備液，再用二倍稀釋法稀釋，陈皮選擇合適的抗油測試濃度範圍，最終四個待測提取物溶液濃度取值分別為0．14、脂氧0.27、0.54、1.08和2.15mg／mL。以抗壞血酸(維生素C)為對照，清除DPPH活性測定方法：取1.0mL各待測溶液，加入3.0mL的409g／mL DPPH乙醇溶液混合，室溫避光反應30min後於517nm下測定吸光值，計算其清除率，清除率(％)=(A0一As)／A0×100％，其中A0為空白組吸光度，As為樣品組吸光度值。先測定各樣品在濃度為4.05mg／mL時對DPPH的清除作用，確定活性較好的樣品，再測定其在不同時間對亞油酸過氧化的抑製作用，具體方法參考文獻進行：將1.0mL不同樣品溶液中加入3mL的2.5％亞油酸一無水乙醇溶液，混勻後置於40℃培養箱。每隔1d(共5d)，取出0.5mL待測樣品，加入lmL 25％TCA混勻，靜置20min後加入lmL 0.67％TBA，沸水浴加熱10min。冷卻後加入4mL正丁醇，搖勻，4000r／min室溫離心10min，取上層液於532nm處比色，同時測定不加抗氧化物的空白管吸光度，計算抑製率。抑製率(％)=(A0—As)／～×100％，其中～為空白組吸光度、As為樣品組吸光度值。
③對卵黃脂蛋白脂質過氧化的抑製作用
化合物1～6用無水乙醇溶解，首先確定各化合物的飽和濃度，為了便於比較，將六個化合物統一配製成較小飽和濃度值的貯備液，為4.02mg／mL。以維生素C做陽性對照，洗脫物1～6用無水乙醇溶解，首先確定各洗脫物的飽和濃度，為了便於比較，將六種洗脫物統一配製成較小飽和濃度值的貯備液，為4.05mg／mL。以維生素C做陽性對照，清除DPPH活性測定提取物1、2和3用無水乙醇溶解，提取物4用蒸餾水溶解，首先確定各提取物的飽和濃度，為了便於比較，將四種提取物統一配製成較小飽和濃度值的儲備液，再用二倍稀釋法稀釋，選擇合適的測試濃度範圍，最終四個待測提取物溶液濃度取值分別為0.14、0.27、0.54、1.08和2.15mg／mL。以抗壞血酸(維生素C)為對照，清除DPPH活性測定方法：取1.0mL各待測溶液，加入3.0mL的4099／mL DPPH乙醇溶液混合，室溫避光反應30min後於517nm下測定吸光值，計算其清除率，清除率(％)=(A0一As)／A0×100％，其中A0為空白組吸光度，As為樣品組吸光度值。先測定各樣品在濃度為4.05mg／mL時對DPPH的清除作用，確定活性較好的樣品，再測定其在不同時間對亞油酸過氧化的抑製作用，具體方法參考文獻進行：將1.0mL不同樣品溶液中加入3mL的2.5％亞油酸一無水乙醇溶液，混勻後置於40℃培養箱。每隔1d(共5d)，取出0.5mL待測樣品，加入lmL 25％TCA混勻，靜置20min後加入lmL 0.67％TBA，沸水浴加熱10min。冷卻後加入4mL正丁醇，搖勻，4000r／min室溫離心10min，取上層液於532nm處比色，同時測定不加抗氧化物的空白管吸光度，計算抑製率。抑製率(％)=(A0—As)／～×100％，其中～為空白組吸光度、As為樣品組吸光度值。先測定各化合物溶液在相同時間對亞油酸過氧化的抑製作用，確定活性較好的樣品，再測定其在不同時間下對卵黃脂蛋白脂質過氧化的抑製作用，脂質體過氧化物采用紫外吸收測定法測定，方法參考文獻改進：取新鮮雞蛋卵黃適量，加入等體積95％乙醇於37℃磁力攪拌10min，抽濾，濾液再用95％乙醇稀釋定容，使濃度達到0.8％。取該溶液0.2mL，分別加入不同濃度待測樣品溶液各lmL，空白加入等體積的無水乙醇，再各加入0.005mol／L的硫酸銅201aL，放入水浴恒溫震蕩器中震蕩，速度為100次／min，溫度為37℃。每24h取0.1mL氧化液加入5mL乙醇，混勻後，以乙醇為空白，用1cm石英比色皿在234nm處測定吸光度值，計算抑製率。抑製率(％)=(Ao—As)／～×100％，其中Ao為空白組吸光度、As為樣品組吸光度值。
④對油脂氧化的抑製作用
配製單體化合物的飽和濃度，再用二倍稀釋法稀釋，確定最適宜濃度範圍，依次測定其在不同濃度下對DPPH的抑製作用,清除DPPH活性測定提取物1、2和3用無水乙醇溶解，提取物4用蒸餾水溶解，首先確定各提取物的飽和濃度，為了便於比較，將四種提取物統一配製成較小飽和濃度值的儲備液，再用二倍稀釋法稀釋，選擇合適的測試濃度範圍，最終四個待測提取物溶液濃度取值分別為0.14、0.27、0.54、1.08和2.15mg／mL。以抗壞血酸(維生素C)為對照，清除DPPH活性測定方法進行：取1.0mL各待測溶液，加入3.0mL的40μg／mL DPPH乙醇溶液混合，室溫避光反應30min後於517nm下測定吸光值，計算其清除率，清除率(％)=(A0一As)／A0× 100％，其中A0為空白組吸光度，As為樣品組吸光度值,對亞油酸過氧化的抑製作用洗脫物1～6用無水乙醇溶解，首先確定各洗脫物的飽和濃度，為了便於比較，將六種洗脫物統一配製成較小飽和濃度值的貯備液，為4.05mg／mL。以維生素C做陽性對照，先測定各樣品在濃度為4.05mg／mL時對DPPH的清除作用，確定活性較好的樣品，再測定其在不同時間對亞油酸過氧化的抑製作用，將1.0mL不同樣品溶液中加入3mL的2.5％亞油酸一無水乙醇溶液，混勻後置於40℃培養箱。每隔1d(共5d)，取出0.5mL待測樣品，加入lmL 25％TCA混勻，靜置20min後加入lmL 0.67％TBA，沸水浴加熱10min。冷卻後加入4mL正丁醇，搖勻，4000r／min室溫離心10min，取上層液於532nm處比色，同時測定不加抗氧化物的空白管吸光度，計算抑製率。抑製率(％)=(Ao—As)／～×100％，其中～為空白組吸光度、As為樣品組吸光度值。對卵黃脂蛋白脂質過氧化的抑製作用化合物1～6用無水乙醇溶解，首先確定各化合物的飽和濃度，為了便於比較，將六個化合物統一配製成較小飽和濃度值的貯備液，為4.02mg／mL。以維生素C做陽性對照，先測定各化合物溶液在相同時間對亞油酸過氧化的抑製作用，確定活性較好的樣品，再測定其在不同時間下對卵黃脂蛋白脂質過氧化的抑製作用，脂質體過氧化物采用紫外吸收測定法測定，取新鮮雞蛋卵黃適量，加入等體積95％乙醇於37℃磁力攪拌10min，抽濾，濾液再用95％乙醇稀釋定容，使濃度達到0.8％。取該溶液0.2mL，分別加入不同濃度待測樣品溶液各lmL，空白加入等體積的無水乙醇，再各加入0.005mol／L的硫酸銅20mL，放入水浴恒溫震蕩器中震蕩，速度為100次／min，溫度為37℃。每24h取0.1mL氧化液加入5mL乙醇，混勻後，以乙醇為空白，用1cm石英比色皿在234nm處測定吸光度值，計算抑製率。抑製率(％)=(Ao—As)／～×100％，其中Ao為空白組吸光度、As為樣品組吸光度值。及對大豆油氧化的抑製作用。對大豆油氧化抑製作用，稱取10mL大豆油，加入lmL樣 品溶液，於48℃水浴恒溫22h，取樣lmL加入 2mL 0.67％TBA溶液，2mL 20％TCA，沸水浴 20min，冷卻至37℃，加入5mL CHCl3溶液，搖 勻，3500r/min離心10min，取上清液於532nm處 測吸光度，空白用溶劑代替樣品溶液，並以維生 素C做陽性對照，計算抑製率。抑製率(％)= (A0一As)/～×100％，其中Ao為空白組吸光度、 As為樣品組吸光度值。
(3)單體化合物的鑒定
測定抗氧化活性較好的單體化合物的紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(1H—NMR)、核磁共振碳譜(13C-NMR)和質譜(MS)並進行分析，鑒定該化合物結構。
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