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重组漆酶降解黄曲霉毒素B1分子对接分析及产物结构解析(三)

来源:时间:2025-04-22 02:44:12

3、重组各因素對AFB1降解率的漆酶影響

由圖5A可以看出,漆酶與AFB1孵育時,降解接分结构解析當孵育時間在12~24h內,黄曲降解率逐漸升高,霉毒時間大於24h,分对降解率趨於穩定為90.33%;由圖5B可以看出,析及在25~30℃範圍內,产物AFB1降解率基本保持不變,重组在35℃達到為大值77.45%,漆酶當溫度在35~40℃範圍內,降解接分结构解析降解率降低,黄曲當溫度大於40℃時,霉毒略微升高,分对與大多數真菌漆酶一樣,析及LAC3是一種相當耐溫的酶,但是耐熱性是關於曝光時間的函數,當溫度高於40℃,該在此條件暴露12h後可能導致失活較快,活性降低;由圖5℃可以看出,在實驗條件範圍內,毒素的降解率隨漆酶酶活力的增加而逐漸升高,當酶活力達到3U時,AFB1的降解率達到峰值74.87%,繼續加大酶量,降解率基本不在增長。

4、響應麵法優化漆酶降解AFB1條件

在單因素試驗基礎上,選擇孵育時間(A)、孵育溫度(B)、酶活力(C),以AFB1的降解率(Y)為響應值,其中-1、0、1分別代表低、中、高3個水平,試驗設計與結果見表3。將數據結果進行多元回歸分析,得到回歸方程:

Y=-504.54600+8.95888A+22.91040B+3.40289C--0.10758AB-0.00550AC-0.037775BC-0.16133A2-0.26762B2-0.012395C2

由表4可知,模型P值小於0.0001,表明該模型極顯著,失擬項P值大於0.05,表明失擬項驗證不顯著,說明回歸方程可靠可以用於AFB1最高降解率條件的預測。A和B對AFB1的降解影響極顯著,A2和C2對AFB1的降解影響顯薯,表明孵育時間、孵育溫度和酶活力對AFB1的降解有顯著的影響,影響程度從大到小為孵育時間>孵育溫度>酶活力。

5、AFB1降解條件的響應麵分析

 

從圖6a可以看出,孵育溫度對應的響應值的曲線陡峭,表明對AFB1降解率影響較大,而孵育時間對應的響應值的曲線相對平緩,表明孵育時間對AFB1降解率的影響不大,孵育時間和孵育溫度的等高線扁平,表明孵育溫度和孵育時間的交互作用對AFB1降解率的影響較大;

從圖6b可以看出,酶活力對應的響應值的曲線陡峭,說明對AFB1的降解率影響較大,而孵育時間對應的響應值曲線相對平緩,表明孵育時間對AFB1降解率的影響不大,酶活力和孵育時間的等高線近似圓形,表明酶活力和孵育時間的交互作用對AFB1降解率的影響較小;從圖6c可以看出,酶活力對應的響應值曲線相對較陡,而孵育溫度對應的響應值曲線較平緩,表明酶活力對AFB1降解率影響較大,酶活力和孵育溫度的等高線扁平,表明酶活力和孵育溫度的交互作用對AFB1降解率的影響較大。

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