維生素C標準曲線的繪製:分別吸取配置好的維生素C標準溶液(1000μg/mL)0.5mL、1mL、效准2mL、确测5mL、定油的方10mL,菜中並用1%的维生鹽酸定容至100mL。獲得濃度為5.0μg/mL、含量10.0μg/mL、种高20.0μg/mL、效准50.0μg/mL、确测100.0μg/mL的定油的方維生素C標準工作液。由圖1可以看出,菜中在5~100μg/mL濃度範圍內,维生維生素C呈現出良好的含量線性關係。回歸方程為y=10241x-1042.1,种高R2=0.9998,相關係數r為0.9999。
5個容量瓶中,分別加入等量的且已知維生C含量的油菜幼苗樣品溶液,然後再分別加入不同量的維生素C標準溶液,充分混勻後,測定樣品中維生素C的含量,計算出該方法的回收率(表1)。從測得結果可知,測定油菜中維生素C含量方法的回收率為97.97%~101.40%。
利用液氮保存樣品並研磨後進行萃取處理,在相同的實驗條件下對同一個油菜幼苗樣品重複測定6次。圖2為油菜中維生素C含量的色譜圖,從圖中可知維生素C的樣品保留時間在2.7min。由表2中的維生素C含量測得結果可知,油菜維生素C含量的平均值為101.54mg/100g,精密度實驗的RSD僅為1.84%,說明此方法測試結果的穩定性和可重複性好。
對從田間取回的新鮮樣品以及在4℃、-20℃和液氮中貯藏3d的小白菜、生菜、菠菜、油菜(8E006)幼苗進行維生素C含量的檢測。經測定,小白菜、生菜、菠菜、油菜幼苗新鮮樣品中的維生素C含量分別為48.65mg/100g、13.75mg/100g、80.46mg/100g、102.67mg/100g。圖3顯示,小白菜、生菜、菠菜、油菜幼苗在4℃、-20℃條件下貯藏3d後,所測維生素C含量顯著低於其新鮮樣品所測維生素C的含量。與新鮮樣品相比,小白菜、生菜、菠菜、油菜幼苗在4℃貯藏3d後所測的維生素C的含量分別下降了43%、48%、44%、51%;在-20℃貯藏3d後分別下降了23%、24%、36%、26%。然而圖3顯示,在液氮貯藏3d的樣品所測得維生素C的含量反而顯著高於其新鮮樣品的含量,分別增加了20%、16%、9%、15%。極可能新鮮樣品在田間取樣及運輸過程中,維生素C發生降解,而低溫可有效阻止維生素C的降解;樣品的貯藏溫度越低,維生素C降解的速度越慢。因此,用液氮貯藏田間取回的樣品更有利於樣品中維生素C的保存和準確測定。
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