機體若長期處於脂質代謝失調、红枣血脂成分異常的色素食小鼠狀態下,會導致高脂血症的对高發生,進而引發動脈粥樣硬化,脂饮脂作從而促發高血壓、降血冠心病、红枣腦血栓等多種疾病。色素食小鼠目前,对高通過調整膳食結構、脂饮脂作中藥調理及適當運動能預防血脂升高,降血而治療高脂血症的红枣必要手段是服用降脂藥。國內外降血脂藥物主要有他汀類、色素食小鼠貝特類、对高煙酸類等,脂饮脂作這些藥物可有效調節血脂代謝,降血降低血脂水平,但價格高昂,且存在不同程度的毒副作用,如他汀類藥物可能會導致肌肉萎縮,增加Ⅰ型糖尿病的患病率,不宜長期服用。因此,尋找無毒高效的降血脂天然成分極為必要。
近幾年,人們開始從天然植物中提取、分離功能活性成分,如藍莓花色苷、木棉花總黃酮、佛手多酚等研究調節血脂的作用,並取得了一定成效。從棗類食品生產的廢棄棗渣中提取的紅棗色素是一種水溶性天然色素,已被證實能清除自由基,具有較好的抗氧化活性、抗脂質過氧化能力,邵佩蘭等又進一步證實了紅棗色素含有多酚、花色苷和黃酮等活性成分,且其抗氧化活性與黃酮和多酚含量呈正相關,此外,紅棗色素對KBrO3誘導的腎損傷、拘束性肝損傷和常壓缺氧有明顯的改善作用,但紅棗色素能否調節高脂小鼠的脂質代謝紊亂,改善脂類成分失衡,抑製高脂血症尚未見報道,本文研究紅棗色素的降血脂作用,以期為紅棗色素在功能性保健食品行業的開發應用提供一定的理論依據。
一、材料與方法
1、材料與儀器
紅棗色素:寧夏大學食品營養與分析實驗室製備;ICR健康雄性小鼠(體重18~22g):寧夏醫科大學實驗動物中心提供,生產許可證號SCXK(寧)2015—0001;高脂飼料(基礎飼料52%,豬油20%,蔗糖10%,全脂奶粉6%,大豆分離蛋白10%,磷酸氫鈣2%):江蘇協同醫藥生物有限公司,總膽固醇試劑盒、甘油三酯試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇試劑盒、載脂蛋白A1試劑盒、載脂蛋白B試劑盒、總酯酶試劑盒:南京建成生物工程研究所,辛伐他汀:濟南利民製藥有限責任公司;其他試劑均為分析純。
U3010紫外可見分光光度計,日本日立有限公司;CT14D11台式高速離心機,美國Labconco公司;Alphal—4真空冷凍幹燥機,德國Christ公司;HH.S11—2電熱恒溫水浴箱,上海博迅實業有限公司;MultiskanMk3酶標儀,上海熱電上海儀器有限公司。
2、試驗方法
(1)動物分組、給藥及處理
小鼠在實驗環境下喂基礎飼料觀察5d,將60隻小鼠按體重隨機分為空白對照組、高脂組、陽性對照組和紅棗色素低、中、高劑量組,每組10隻。實驗期間除空白對照組喂基礎飼料外,其餘各組均喂高脂飼料,同時灌胃給予受試物。紅棗色素組分別以312.5mg/kg、625mg/kg和1250mg/kg灌胃,陽性對照組以辛伐他汀(5mg/kg)灌胃,空白對照組和高脂組給予等量生理鹽水,連續4周。末次給藥後,小鼠禁食不禁水16h,稱量體重,摘眼球取血,收集血液於抗凝管中,於40C、3500r/min離心10min,分離血清。小鼠頸椎脫臼處死,解剖取出各髒器,稱重,並將肝髒放入玻璃勻漿管中,加入9倍體積的40C生理鹽水,充分研磨製成10%肝組織勻漿。
(2)體重、髒器指數的測定
實驗過程中每一周定期稱量,記錄小鼠體重。將解剖取出的腦、心髒、肝髒、脾髒、腎髒用生理鹽水衝洗除去表麵雜質,濾紙吸幹,稱重,並計算小鼠髒器指數。
(3)血脂、載脂蛋白含量的測定
取各組血清,按照測定試劑盒操作說明分別測定血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、ApoA1和ApoB含量,並計算AI。
(4)脂蛋白脂酶、肝脂酶活力的測定
取各實驗組10%肝勻漿,按照總酯酶試劑盒操作說明分別測定肝髒LPL、HL活力,並根據公式計算總酯酶活性。
總酯酶活性(U/mL)=脂蛋白脂酶活性+肝脂酶活性
3、數據處理
所有實驗數據以均數±標準差來表示。結果采用SPSS13.0進行單因素方差分析,以p<0.05為具有顯著性差異,p<0.01為具有極顯著性差異。
二、結果與分析
1、紅棗色素對小鼠體重髒器指數的影響
紅棗色素對小鼠體重的影響如表1所示,隨著飼喂時間的推移,各組小鼠體重均有增加,而高脂組小鼠體重較空白對照組增加4.83g(p<0.05),表明長期高脂飲食會使小鼠體重增加。在給予紅棗色素幹預後,紅棗色素低、中、高劑量組小鼠相對高脂組體重減少1.77.2.05、2.66g(p<0.05),說明紅棗色素在一定程度上可以抑製高脂飲食導致的小鼠體重增加,且劑量越大,抑製效果越顯著。
髒器指數能直觀的反映實驗動物的營養狀態和髒器的病變情況。紅棗色素對小鼠髒器指數的影響如表2所示,與空白對照組相比,高脂組小鼠腦/體、心/體、肝/體指數均明顯升高(p<0.05),表明長期高脂飲食可能會引起肝髒的病理性變化(充血、水腫、增生或炎症等)及心腦血管損傷。與高脂組相比,紅棗色素能明顯降低小鼠的肝/體指數(p<0.05),且呈一定劑量依賴性,說明一定劑量紅棗色素對肝髒具有保護作用。這與單科開提取的苦菜黃酮效果一致,但低劑量苦菜黃酮對小鼠肝髒指數影響不顯著,且高劑量效果相比紅棗色素較差,可能是二者灌胃的黃酮含量存在差異導致。
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