分別稱取不同類別糕點各3份，按濃度低中高三個水平進行試驗，中种精密加線性7(理論濃度為50μg/mL)0.40mL，添加精密量取苯甲酸對照品51.28mg置25mL量瓶中，剂含究加甲醇溶解並稀釋至刻度，量测理方搖勻，定及即得濃度為2.0471mg/mL的前处苯甲酸儲備液；稱取山梨酸對照品51.88mg置25mL量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，法优搖勻，化研即得濃度為2.0690mg/mL的糕点山梨酸儲備液；稱取糖精鈉對照品55.10mg置25mL量瓶中，加水溶解並稀釋至刻度，中种搖勻，添加即得濃度為1.9007mg/mL的剂含究糖精鈉儲備液，糖精鈉相對分子質量為205.16，量测理方糖精相對分子質量為182.16，定及兩者折算係數為0.8874，故折算為糖精濃度為1.6867mg/mL；稱取脫氫乙酸對照品51.71mg置25mL量瓶中，加20g/L氫氧化鈉4mL溶解，用水定容至刻度，即得濃度為2.0477mg/mL的脫氫乙酸儲備液，對照品儲備液5.0mL至100mL容量瓶中，以水定容。準使用液2.00mL，得到添加量(理論值)為10、100、1000mg/kg的低、中、高三個水平上機液，結果見圖4，結果表明，在本試驗方法下所得到的4組分的不同類別糕點回收率較高，方法準確性好，同時根據GB/T27404要求，被測含量＞100mg/kg，回收率範圍為95～105％；被測含量1～100mg/kg，回收率範圍為90～110％，從結果數據看，本試驗回收率均符合國標要求。
分別稱取糕點、月餅、辣條樣品各7個批次，按本試驗確定的樣品前處理方法和色譜條件，製備供試液並上機測定，結果見表6，樣品色譜圖見圖5(每個類別選擇一種一個批次)，從結果可見，分類為糕點的樣品所檢測出來的山梨酸、脫氫乙酸含量均符合GB27602014中關於山梨酸和脫氫乙酸最大使用量的要求，同時並未檢測出苯甲酸以及糖精鈉，也達到檢測要求。
本試驗采用高效液相色譜法同時測定糕點中4種防腐劑含量並對樣品前處理進行探討及優化，尋求一種能夠同時對不同類別的糕點進行樣品前處理的優化方法。本試驗在提取溶劑選擇、提取時間、蛋白沉澱劑加人量以及淨化方式上進行考察，選擇最優的前處理條件確定樣品前處理方法，並進行方法學考察，通過試驗，本方法線性範圍在0～50μg/mL範圍內良好，回收率達到要求，4組分的分離度滿足檢測需要，基質檢測限也比國標低，滿足食品檢測要求，本試驗的前處理方法能夠同時滿足糕點(麵包)、月餅、辣條三類樣品，前處理能夠將雜質處理比較幹淨，對4組分峰型及分離度影響較小，為食品添加劑的檢測提供一定的數據參考意義。
目前，由於這4組分的防腐劑和甜味劑所用的檢測波長接近紫外波長範圍的末端吸收，假陽性樣品的檢出也比較多，采用PDA檢測器中的光譜進行假陽性確認也有一定弊端，因為光譜的純度角度、閾值的計算，與積分參數、采樣速率、分辨率、波長範圍、濃度、溶劑類型、噪音基線、閾值計算方式、譜帶展寬等多方麵因素有關，甚至有標準品溶液也會出現純度角度＞純度閾值的情況，這時需要重新建立角度計算方法，故光譜的純角度閾值可以作為參考，並不能真正意義的對假陽性樣品進行確認，本試驗下一步的試驗方案將開發液相色譜串聯質譜方法對假陽性樣品進行定性定量確認。
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