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多見於海鹽田和陸地鹽湖中

来源:时间:2025-05-06 16:10:06

一、盐藻研究鹽藻的国保現狀

鹽藻是一種喜鹽的單細胞微藻,多見於海鹽田和陸地鹽湖中。健食进展在自然界中,品中很少有生物像鹽藻這樣,盐藻研究能夠在如此高鹽的国保環境下生存。鹽藻體內含有大量的健食进展β-胡蘿卜素,是品中天然β-胡蘿卜素的重要來源。鹽藻源β-胡蘿卜素在我國以及全世界的盐藻研究保健食品中有著一定的應用前景。

1、国保鹽藻

鹽藻,健食进展拉丁名為Dundliellasalina,品中又稱杜氏藻(以下統稱鹽藻),盐藻研究屬植物界、国保綠藻綱、健食进展團藻目、杜氏藻科、杜氏藻屬的單細胞藻類。

鹽藻由羅馬尼亞人E.C.Teodoresco首次發現,並在1838年首次被法國MichelFelixDuIlal報道。1905年,德國的Teodoresco和ClaraHamburger將這種生物描述為一個新的、獨立的屬,且這種分類延續至今。目前,杜氏藻屬(Dunaliella)中已鑒定了53種藻種。

杜氏藻屬的物種在形態上與萊茵氏衣原體(Chlamydomonasreinhardtii)相似,二者的區別在於:杜氏藻屬的物種缺乏細胞壁和收縮液泡,有兩條等長鞭毛和一個單杯狀葉綠體,且常含有中央核,其中的葉綠體中含有大量的β-胡蘿卜素,使藻體呈桔紅色。除了類胡蘿卜素外,鹽藻體內還存在大量的甘油。藻體的形狀和對稱性取決於環境條件。鹽藻缺乏堅硬的細胞壁,這使得生物體容易受到滲透壓的影響。甘油被用作維持滲透平衡和酶活性的重要物質而大量存在於藻體內。D.salinaTeodor具有最高的β-胡蘿卜素含量(平均14%,w/w),D.sp.SPMO980625-IE具有最高的藻油含量(平均37%,w/w)。

2、β-胡蘿卜素

β-胡蘿卜素是一種類胡蘿卜素,其習慣命名為β-胡蘿卜素,半係統命名為β-胡蘿卜素,分子式為C40H56,CAS號為7235-40-7。β-胡蘿卜素分子由中央多聚烯鏈和兩端的六元環末端基團組成,為雙環結構,其全反式異構體呈幾何中心對稱。由於中央共軛多烯鏈的存在,使整個分子具有高度的不飽和性,可形成多種幾何異構體。雖然在自然界中它經常以全反式異構體的形式存在,但也常見其13Z-和9Z-順式異構體的存在。

早在一個世紀前,人類就知道,β-胡蘿卜素可在哺乳動物的小腸中水解生成維生素A,進而參與視覺生理代謝。因此,它被稱為維生素A原。β-胡蘿卜素類是良好的自由基猝滅劑,具有良好的抗氧化作用。它可有效地阻斷細胞內的鏈式自由基反應,因而被認為是治療和預防由此引起的許多頑疾的理想物質。經過上世紀90年代的研究,9Z-異構體獨特的保健功能(如生物利用度高、增強免疫功能顯著等)已漸被認知,成為人們研究的重點。

3、鹽藻源β-胡蘿卜素

為了在高鹽條件下生存,鹽藻體內積累了高濃度的β-胡蘿卜素,以防止強烈的光照和高濃度的鹽對細胞形成滲透壓差造成的傷害。由於能在體內積累大量的β-類胡蘿卜素,鹽藻及其提取物具有很強的抗氧化活性。因此,鹽藻及提取物(主要含β-胡蘿卜素)在我國及世界各國已被用於保健食品中,製成了以抗氧化、增強免疫等為功能的產品。

經常用於生產β-胡蘿卜素的藻種是D.salina,含量為2%~14%(w/dw)。我國內蒙古和甘肅鹽湖中養殖的鹽藻中β-胡蘿卜素的含量為4%~5%(w/dw)。與高等植物源和人工合成的β-胡蘿卜素不同,鹽藻中的β-胡蘿卜素組分含有大量Z-異構體,主要包括9Z-和13Z-異構體等。

1966年,前蘇聯建立了世界上第一個用於商業生產的鹽藻源β-胡蘿卜素中試工廠。目前,從低端的鹽湖大麵積養殖到高端的高密度集約培養,全世界用於生產β-胡蘿卜素的鹽藻商業化養殖技術已經成熟,包括收獲、“跑道池”和鹽田養殖等技術。在我國,以內蒙古地區的鹽湖基地為骨幹,從鹽藻中製備天然β-胡蘿卜素的產業已經發展成獨立的產業體係。

由於鹽藻藻粉的含水量很低,不同原料中病原菌和有害微生物的數量均可控製在很低的水平。由於鹽藻提取物為油溶性的脂類提取物,不同原料中病原菌和有害微生物均未檢出。鹽藻及提取物中重金屬的檢測指標包括鉛、砷和汞(以鉛計)。其中,不同原料中砷的含量差異較大,這是由養殖技術的差異所造成的。高砷含量產品大部分出自於使用循環水的養殖基地。

已經陸續成熟的提取方法有:(1)有機溶媒萃取法,包括:正己烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等萃取法,(2)超臨界二氧化碳流體萃取法。

由於鹽藻的細胞壁很脆弱,且β-胡蘿卜素在其體內處於遊離態,故上述萃取技術均可得到滿意的β-胡蘿卜素轉移率,一般可達到92%~95%(w/w)。

我國已頒布的新食品原料公告,要求鹽藻提取物中β-胡蘿卜素的含量≥8%(w/w)。實際上,我國內蒙古地區生產的提取物中β-胡蘿卜素的含量可達到12%~15%(w/w)。

二、鹽藻源產胡蘿卜素在保健食品中幾何異構體組成的測定

1、β-胡蘿卜素幾何異構體組成的測定

總β-胡蘿卜素的UV-VIS測定方法詳見GB8821-2011和GB28310-2012。總β-胡蘿卜素的HPLC測定方法詳見NY/T82.15-1988和DB64/T1514-2017。這些方法均可應用於檢測保健食品中鹽藻源總β-胡蘿卜素的含量。各類胡蘿卜素組分的鑒定也已建立。鹽藻源β-胡蘿卜素在保健食品中幾何異構體組成的測定尚未報道。

(1)幾何異構體的分離

眾所周知,β-胡蘿卜素組分可以應用HPLC在C18柱上被很好地與其它類胡蘿卜素組分分離。配合在線的PDA檢測器,β-胡蘿卜素組分可以在大多數樣品中得到鑒定和定量。

因此,C18-HPLC-PDA已成為定性、定量檢測β-胡蘿卜素的常用方法。但是,β-胡蘿卜素幾何異構體的分離在C18柱上遇到很大困難。C30柱的出現為β-胡蘿卜素幾何異構體的分離提供了新的選擇。由於C30烷基的鏈長與類胡蘿卜素分子的長度接近,因而二者的相互作用得到了增強。所以,C30柱在分離幾何異構體時顯示出明顯的優勢。另外,C30固定相較長的烷基鏈也增加了固定相的疏水性,導致非極性類胡蘿卜素的保留時間增加,從而提高了柱效。圖1為惠伯棣等人發表的β-胡蘿卜素在C30-HPLC的分離色譜圖。

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