3、食品操作步驟

(1)樣品處理

①水溶性固體樣品的添加處理(如白糖)：稱取搗碎均勻樣適量，用少量水溶解後轉移到100mL容量瓶中，测定加0.5mol/L NaOH 4mL，白剂搖勻，测定加0.5mol/L H₂S0₄4mL，食品加Na₂HgCl₄20mL吸收，添加用水定容至100mL，测定過濾備用。白剂

②其他固體樣品的测定處理(如粉條)：稱取粉碎均勻樣適量，少量水濕潤，食品轉移到100mL容量瓶中，添加加Na₂HgCl₄ 20mL吸收，测定浸泡4小時以上(若上層液不澄清，白剂要加入亞鐵氰化鉀及乙酸鋅溶液各2.5mL)，测定用水定容至刻度，過濾，濾液備用。

③液體樣品處理(如葡萄酒)：直接吸取5.0～lO.0mL樣品，置於100mL容量瓶中，以少量水稀釋，加20mL四氯汞鈉吸收液，搖勻，最後加水至刻度，混勻，必要時過濾備用。

(2)標準曲線的繪製

吸取0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，4.0mL二氧化硫標準使用液(相當於0.0，0.4，0.8，1.2，1.6，2.O，3.0，4.0μg二氧化硫)，分別置於25mL具塞比色管中。各加入四氯汞鈉吸收液至10mL，然後再加入1mL氨基磺酸銨溶液(12/L)、1mL甲醛溶液(2/L)及1mL鹽酸副玫瑰苯胺溶液，搖勻，放置15min。用1cm比色杯，以零管調節零點，於波長550nm處測定吸光度，並繪製標準曲線。

(3)樣品分析

吸取O.50～5.0mL樣品處理液(視含量高低而定)於25mL具塞比色管中。按標準曲線繪製操作進行，於波長550nm處測吸光度，並與繪製標準曲線比較定量。

4、注意事項

①此反應的最適反應溫度為20～25⁰C，溫度低靈敏度低，所以標準係列管和樣品在相同溫度下顯色；

②反應溫度如果為15一16℃，靜置時間需延長為20分鍾；

③鹽酸副玫瑰苯胺中的鹽酸用量對顯色有影響，加入鹽酸量多，顯色淺；加入量少，顯色深，所以配製試劑時一定要按操作進行；

④甲醛濃度在0.15％～0.25％時，顏色穩定，所以應選擇0.2％甲醛溶液；

⑤測定樣品顏色較深的樣品，可用10％活性炭脫色；

⑥樣品加入Na₂HgCl₄吸收液於100mL容量瓶中加水至刻度，搖勻，此液在24小時內很穩定，否則於4℃可使用一周；

⑦此法測SO₂采用HgCl₂毒性很強，故實驗時應注意安全。近幾年有科技報道采用EDTA(乙二胺四乙酸)試劑代替四氯汞鈉，但此實驗沒有證實過；

⑧亞硫酸與食品中的醛(乙醛等)、酮(酮戊二酸、丙酮酸)和糖(葡萄糖、果糖、甘露糖)結合，形成結合態亞硫酸，樣品處理時加入氫氧化鈉目的是使結合態的亞硫酸釋放出來，加硫酸為了中和堿，保證顯色反應在酸性條件下進行；

⑨亞硝酸對反應有幹擾，加入氨基磺酸銨目的是去除亞硝酸的幹擾。

(二)滴定法(葡萄酒中二氧化硫的測定)

1、原理

利用碘可以與二氧化硫發生氧化還原反應的性質，用碘標準溶液作滴定劑，澱粉作指示劑，測定樣品中二氧化硫的含量，反應式如下：

I₂+SO₂+2H₂0==2I^-+S0₄^2-+4H⁺

2、試劑

①碘化鉀、重鉻酸鉀。

②硫酸溶液(1+3)：取50mL硫酸(p約1.84g/mL)，慢慢加入到150mL水中。

③硫酸溶液(1+4)：取50mL硫酸(p約1.84g/mL)，慢慢加入到200mL。水中。

④硫代硫酸鈉標準溶液,c(Na₂S₂O₃·5H₂O)=0.1mol/L。

a．配製：稱取26g硫代硫酸鈉(Na₂S₂0₃·5H₂0)(或16g無水硫代硫酸鈉)，崩新煮沸且已冷卻的蒸餾水溶解，並稀釋至1000mL，混勻。貯於棕色瓶中，放兩周後使用。

b．標定：稱取0.15g於120⁰C烘至恒重的基準重鉻酸鉀，精確至0.0001g，置於碘量瓶中，加入25mL水使之溶解，加2g碘化鉀及20mL硫酸溶液(1+4)，混勻，於暗處放置10分鍾，加入150mL水，崩硫代硫酸鈉標準溶液(0.1mol/L)滴定。近終點時加0.5mL澱粉指示劑溶液(10g/L)，繼續滴定至溶液由藍色變為亮綠色。同時作空白試驗。

參考資料：食品中有毒有害物質檢測

相關鏈接：二氧化硫，亞鐵氰化鉀，硫代硫酸鈉