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抑制烟草青枯病的3株放线菌筛选及鉴定(二)

来源:时间:2025-04-22 02:58:58

2.2拮抗菌抑菌譜測定

3株拮抗放線菌菌株抑製其他病原菌的抑制烟草結果如表1所示,3株放線菌的青枯固體菌塊和發酵液對煙草猝倒病原菌均無抑製效果,菌株SC-105-B-10的株放發酵液和菌株L2-003-A-5的固體菌塊對煙草黑脛病原菌具有較弱的抑製效果;3株菌的固體菌塊和發酵液對赤星病原菌均有抑製效果,對辣椒、线菌番茄和馬鈴薯等茄科類植物青枯病原菌均有抑製作用,筛选即3株放線菌對茄科類植物青枯病原菌具有廣譜的抑制烟草拮抗作用。

2.3菌株SC-105-B-10的青枯鑒定

2.3.1菌株的SC-105-B-10形態特征

菌株SC-105-B-10在掃描電鏡下的形態如圖2所示,菌株的株放氣生菌絲明顯呈短直鏈狀,孢子鏈的线菌長度不一;孢子呈短圓柱形,四周有內陷現象。筛选氣生菌絲生長能力強,抑制烟草基內菌絲錯綜生長,青枯孢子鏈密集。株放將菌株SC-105-B-10在供試的线菌8種培養基上進行培養和觀察,發現在馬鈴薯浸汁瓊脂和營養瓊脂中長勢很弱,筛选但在高氏一號瓊脂上長勢較好(圖3);在其他8種培養基上氣生菌絲多呈灰白或淡黃色,基內菌絲呈灰綠色,無可溶性色素(表2)。

2.3.2菌株SC-105-B-10的生理生化特征

通過對各拮抗菌株生理生化特征的檢測,獲得如表3所示的實驗結果。菌株SC-105-B-10的pH生長範圍是6~9,pH7~8時長勢最好,在低於pH6和高於pH9的條件下不能生長。菌株SC-105-B-10耐受10%NaCl;可生長的溫度範圍為25~45℃,最適溫度為30℃。澱粉水解試驗、凝固牛奶、纖維素、油脂、產H2S、過氧化氫酶和甲基紅反應陽性,液化明膠、硝酸鹽還原和苯丙氨酸脫氫酶反應呈陰性。

2.3.3菌株SC-105-B-10的16SrRNA基因部分序列分析

測序結果表明菌株SC-105-B-10的16SrRNA基因部分序列長度為1492bp,在GenBank核酸登錄號為KT633863。根據係統發育分析,菌株SC105-B-10屬於鏈黴菌屬(Streptomyces),與Streptomy-cesgriseussubsp.griseusKCTC9080T、Streptomycescy-aneofuscatusNRRLB-2570T、Streptomycescinereorec-tusNBRC15395T、StreptomycesfulvorobeusNBRC15897T、StreptomycesmicroflavusNBRC13062T和StreptomycesfulvissimusDSM40593T聚為一簇,與這些菌的16SrRNA基因序列相似性均為99.7%。通過鄰接法構建的基於菌株SC-105-B-10及相關菌株16SrDNA序列的係統發育樹如圖4所示。

綜合分析多種鏈黴菌的特性(Rongetal,2010;黃苛等,2010;邵陽,2011;李濤等,2007),菌株SC-105-B-10的形態特征和生理生化特征與細黃鏈黴菌(S.microflavus)更接近(王慧玲等,2009;Da‐vid,2011;Lanootetal,2005),因此判斷SC-105-B10是細黃鏈黴菌的一個菌株。

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