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离子色谱法测定碳酸饮料中5种添加剂的方法研究(一)

来源:时间:2025-04-22 02:32:11

食品添加劑已被廣泛使用於食品加工的离色很多領域;近年來,消費者對食品中各種添加劑的谱法安全性日益關注,特別是测定人工合成的添加劑越來越受到人們的重視。目前,碳酸添加飲料生產廠家向飲料中添加的饮料研究甜味劑主要有糖精鈉、甜蜜素和安賽蜜,中种添加的离色防腐劑主要有山梨酸苯甲酸。 

這幾種添加劑的谱法測定,目前中華人民共和國國家標準食品理化檢驗方法GB/T5009.28,测定29-2003、碳酸添加GB/T5009.97-2003、饮料研究GB/T5009.140-2003分別規定了食品中山梨酸、中种苯甲酸和糖精鈉的离色測定、食品中環己基氨基磺酸鈉(又名甜蜜素)的谱法測定以及飲料中乙酰磺胺酸鉀(又名安賽蜜)的測定,山梨酸和苯甲酸的测定測定,國標第一法是氣相色譜法,樣品提取比較麻煩,而且毒性也較大,第二法用的是液相色譜法,而糖精鈉和乙酰磺胺酸鉀國標法采用的也是高效液相色譜法,由於測定方法不一樣,所用的儀器條件也不一樣,應分別進行測定,而甜蜜素的測定國家標準采用的是氣相色譜法,樣品處理比較麻煩,要進行衍生化處理,而且所用試劑毒性也比較大,也費時間;也有文獻報道采用反相高效液相色譜法同時測定乙酰磺胺酸鉀及糖精鈉、苯甲酸、山梨酸含量,但不能同時測定環己基氨基磺酸鈉,因此建立一種同時測定碳酸飲料中多種添加劑的方法十分必要。在此我們建立了一種新的測定方法,即采用自動淋洗、電導抑製離子色譜法,同時對碳酸飲料中5種添加劑進行測定,並應用於實際樣品的檢測,結果令人滿意。 

1材料與方法

1.1儀器設備與試劑

儀器設備ICS2500離子色譜儀,配置ED50電導檢測器,EG50淋洗液發生器,GP50梯度泵,Chromeleon色譜工作站(美國戴安公司);MILLIPORE超純水機(法國)。試劑苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精鈉和乙酰磺胺酸鉀(安賽蜜)的標準儲備溶液由相應的標準品(美國Sigma公司生產)配製,標準儲備液濃度為苯甲酸、山梨酸和乙酰磺胺酸鉀均為1mg/ml,甜蜜素和糖精鈉均為2mg/ml;高純水(電阻率大於18MΩ*cm)。

1.2方法

1.2.1測定原理 

碳酸飲料中苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精鈉和乙酰磺胺酸鉀經AS19色譜柱分離後,以保留時間定性,峰麵積定量。

1.2.2色譜條件

色譜柱:IonPacRAS194×250mm,保護柱:IonPacRAG194×50mm;ASRS-ULTRA抑製器,抑製電流50mA,淋洗液為18mM的氫氧化鉀溶液,流速1.0ml/min,柱溫30℃,進樣量25μl,保留時間定性,峰麵積定量。

1.2.3標準曲線製備

1.2.3.1混合標準溶液配製 

準確吸取苯甲酸和山梨酸標準儲備液各25.0ml、糖精鈉和甜蜜素標準儲備液各12.5ml、乙酰磺胺酸鉀標準儲備液5.0m置於100ml容量瓶中,加高純水至刻度,混勻備用,此溶液含苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精鈉各250μg/ml,乙酰磺胺酸鉀為50μg/ml。

1.2.3.2標準曲線製備 

吸取甜蜜素、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和乙酰磺胺酸鉀的混合標準溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml,分別置於50ml容量瓶中,加高純水定容至刻度混勻,甜蜜素、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的濃度各為5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、30.0μg/ml,乙酰磺胺酸鉀濃度為1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0μg/ml,以此作為標準係列應用液,按上述色譜條件進行測定,每個濃度重複3次,以濃度為橫坐標,峰麵積均值為縱坐標,繪製標準工作曲線。

1.2.4樣品測定 

將試樣加熱,攪拌除去二氧化碳或超聲脫氣,然後吸取一定體積除去二氧化碳後的試樣,用高純水稀釋10倍(根據試樣中被測物含量高低進行稀釋),用0.45μm微孔濾膜過濾,濾液供離子色譜測定,進樣25μl。

1.2.5結果計算 

根據樣品峰的峰麵積,在標準工作曲線上查含量,再換算出樣品中甜蜜素、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和乙酰磺胺酸鉀的含量。

2結果

2.1標準線性實驗結果及標準色譜圖

苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精鈉和乙酰磺胺酸鉀(安賽蜜)的標準線性實驗結果見表1和表2,線性範圍分別為,苯甲酸、山梨酸、甜蜜素、糖精鈉均為5.0~30μg/ml,安賽蜜為1.0~6.0μg/ml。標準色譜圖見圖1。

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