馬鈴薯（SolanumtuberosumL.）是超高串联僅次於小麥、稻穀和玉米的效液相色全球第四大重要的糧食作物，與小麥、谱–稻穀、质谱中种玉米、法测高粱並稱為世界五大作物。定马中國主要薯類作物年種植占全國可用耕地8%左右，铃薯其中，必需馬鈴薯和甘薯的氨基種植麵積和總產量均居世界第一位。馬鈴薯含有豐富的超高串联蛋白質、碳水化合物、效液相色膳食纖維、谱–礦物質元素和維生素等營養物質。质谱中种馬鈴薯中的法测蛋白質除了由非必需氨基酸構成外，也含有大量的定马必需氨基酸。必需氨基酸指人體不能自己合成，需要從食物中獲取的氨基酸，共有8種：賴氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸。必需氨基酸攝入不足會影響機體的生理機能，造成代謝紊亂、機體抵抗力下降等。世界衛生組織（WHO）把氨基酸列為人體必須的營養素之一。2015年1月，在北京舉辦的馬鈴薯主糧化發展戰略研討會，以馬鈴薯主糧化與國家糧食安全為主題，深入研討了馬鈴薯主糧化的戰略意義、發展思路、目標任務和推進途徑，突顯出馬鈴薯產業發展的新機遇，因此針對馬鈴薯中的必需氨基酸進行檢測分析，對於優選馬鈴薯品種具有重要意義。
目前，馬鈴薯中氨基酸的研究已有報道，趙鳳敏等對不同品種的馬鈴薯進行了氨基酸營養價值評價，並篩選出6種氨基酸營養價值較高的品種；曾凡逵等研究了馬鈴薯澱粉加工過程中，分離汁水回收的蛋白質氨基酸的組成，並對其進行了分析，必需氨基酸占總氨基酸的40.80%；黃闖等研究了馬鈴薯蛋白水解液的氨基酸組成和含量，結果表明氨基酸組成比較平衡。雖然以上研究在馬鈴薯氨基酸分析檢測方麵做出一定成果，但均采用了氨基酸自動分析儀進行分析。在氨基酸分析方麵，也有研究者采用柱前衍生–高效液相色譜法進行分析，如測定靈芝孢子粉、新鮮煙葉、野芭蕉、保健食品等物質中氨基酸的含量。除此之外，超高效液相色譜–串聯質譜法近年來發展迅速，在醫學、食品、藥品等方麵被廣泛應用，並且作為一種優秀的分析技術被應用於測定不同物質中的氨基酸成分，如測定天南星、橄欖果實、植物酵素、茶葉等物質中氨基酸含量。相比較氨基酸自動分析和柱前衍生–高效液相色譜法，超高效液相色譜–串聯質譜法具有高靈敏度、反應條件簡單、節約操作時間等優點。
目前，在采用超高效液相色譜–串聯質譜法測定馬鈴薯中氨基酸含量方麵的研究仍屬空白，因此筆者建立了超高效液相色譜–串聯質譜法同時測定馬鈴薯中纈氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、色氨酸8種必需氨基酸的分析方法。
超高效液相色譜儀：Ultimate3000型，美國賽默飛世爾科技公司。三重四級杆質譜儀：TSQEndura型，配備電噴霧離子源（ESI），美國賽默飛世爾科技公司。高速冷凍離心機：5430R型，德國艾本德股份公司。超聲波振蕩器：FB15065型，美國賽默飛世爾科技公司。渦旋混合器：MultiReax多通道型，德國海道爾夫公司。圓周振蕩器：MS3digital型，德國艾卡公司。電子天平：ME204E型，萬分之一，瑞士梅特勒–托利多集團。刀式混合研磨儀：GrindomixGM200型，德國萊馳公司。均質機：T18digital型，德國艾卡公司。超純水機：Milli-Q型，美國默克公司。
17種氨基酸混合標準溶液：甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、脯氨酸、纈氨酸、蘇氨酸、胱氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、天冬氨酸、賴氨酸、穀氨酸、蛋氨酸、組氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、酪氨酸的質量濃度均為2.50μmol/mL，日本和光純藥工業株式會社。色氨酸標準品：純度為99.9%，中國食品藥品檢定研究院。甲醇：色譜純，德國CNW公司。甲酸：色譜純，天津市福晨化學試劑廠。馬鈴薯樣品：品種分別為福瑞特、226、黑心一號和青九，分別采自烏蘭忽洞村、吉恒太村、紅崖灣和新民村。實驗用水為超純水。
色譜柱：AccucoreHILIC柱（150mm×2.1mm，2.6μm，美國ThermoFisher公司）；保護柱：AJO–4287C18柱（4mm×3mm，美國Phenomenex公司）；柱溫：30℃；進樣室溫度：10℃；流動相：含0.1%（體積分數）甲酸的55%（體積分數）甲醇水溶液；等度洗脫；流量：0.20mL/min；進樣體積：2μL。
離子源：電噴霧電離（ESI）源；掃描方式：正離子掃描；檢測方式：多反應監測（MRM）模式；離子源溫度：350℃；離子傳輸管溫度：350℃；離子噴霧電壓：4500V；鞘氣流量：8.0L/min；輔助氣流量：3.0L/min；碰撞氣：氬氣；8種必需氨基酸的MRM質譜參數見表1。
準確稱取色氨酸標準品於50mL容量瓶中，加入0.1mol/L鹽酸溶液溶解並定容至標線，上下顛倒混勻，製得質量濃度為2.50μmol/mL的色氨酸標準儲備液。
吸取17種氨基酸混合標準溶液150μL，再吸取1.3.1中色氨酸標準儲備液150μL，用超純水定容至10mL，得到質量濃度均為37.5μmol/L的混合標準中間液，再根據需要，采用超純水配製成纈氨酸、蘇氨酸、亮/異亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸的質量濃度均分別為0.2、0.9、1.9、2.8、3.8、4.7、5.7μmol/L，色氨酸質量濃度分別為0.1、0.2、0.5、0.7、0.9、1.4、1.9μmol/L，賴氨酸質量濃度分別為0.9、2.4、3.8、5.2、6.6、8.0、9.4μmol/L的氨基酸係列混合標準工作溶液。
馬鈴薯洗淨切塊，研磨並勻漿，精密稱取1g（精確至0.0001g）混合均勻的樣品，置於50mL離心管中，加入25mL超純水，渦旋，振蕩，混合，超聲提取10min，以10000r/min速率於4℃條件下離心10min，吸取上清液200μL，用水定容至10mL，上下顛倒，搖勻，溶液過0.22μm微孔濾膜，注入液相色譜質譜儀，待測。
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