2.3.6 穩定性實驗

稱取樣品粉末1.0 g，不同按“2.3.3”項下方法製備供試品溶液，树脂数鸡室溫放置，环纹分別於0、血藤析和2、药材4、质量6、不同8、树脂数鸡13、环纹24 h進樣測定，血藤析和結果顯示染料木素、药材芒柄花素的质量RSD分別為1.02%、0.86%，不同表明樣品在24 h內穩定。树脂数鸡

2.3.7 重複性試驗

精密稱取同一樣品6份，环纹每份1.0 g，按“2.3.3”項下方法製備供試品溶液，結果顯示染料木素、芒柄花素的RSD分別為1.61%、0.76%，表明本方法重複性良好。

2.3.8 加樣回收率實驗

取已知含量的樣品粉末6份，每份0.5 g，精密稱定，分別加入染料木素、芒柄花素的對照品0.012 mg，按“2.3.3”項下方法製備供試品溶液進行測定。結果詳見表4。
2.3.9 樣品中芒柄花素、染料木素的含量測定
取樣品雞血藤粉末1 g，精密稱定，每批藥材平行3份，按“2.3.3”項下方法製備供試品溶液並測定，計算含量。結果見表3及圖2。

由表3和圖2可看出，除了從化居群1、2和4環樣品，其他樣品的醇溶性浸出物含量均能達到《中國藥典》的規定（不低於8%）。梅州和從化居群的醇溶性浸出物都在3環達到峰值，變化趨勢在4環之前基本一致，4環之後含量變化趨勢不一致；惠州居群由於采樣的限製，隻采集到3、4、7、8和9環的樣品，采樣的環數不連續，故無法從1環開始分析其結果，但可看出3環到4環呈增加的趨勢，7環以上的樣品中醇溶性浸出物的含量基本保持穩定。同一植株具有不同的樹脂環紋數的原兒茶酸含量差異較大，且不同居群樣品中的變化趨勢不一致。雞血藤中兒茶素與表兒茶素的含量較高，不同樹脂環紋數藥材中的含量變化較為明顯，二者的變化趨勢基本一致，但不同居群樣品中的變化趨勢則不相同。芒柄花素與染料木素的含量變化差異較小，且具有較為一致的變化趨勢（先下降再上升，幅度較小），二者的含量在不同居群來源樣品中的變化趨勢亦較為一致。

2.4 相關性分析

采用SPSS對環紋數與醇溶性浸出物及5個化學組分含量的數據進行正態性檢驗，由於芒柄花素數據不符合正態分布，故采用Spearman雙變量相關性分析，相關係數見表5。

由表5可知，環紋數與醇溶性浸出物及5個化學成分的相關性均不顯著。其中醇溶性浸出物含量與染料木素含量具有顯著相關性，與芒柄花素含量具有極顯著相關性；表兒茶素含量與兒茶素含量具有非常顯著相關性，與芒柄花素具有顯著相關性；染料木素與芒柄花素具有非常顯著相關性。

結合含量測定結果與實地調查綜合分析發現，雞血藤環紋數與醇溶性浸出物及5個化學成分均無顯著相關性，3環以上的樹脂環中，芒柄花素、染料木素在植株中變化較小，而兒茶素、表兒茶素、醇溶性浸出物均較高，故3個樹脂環以上的雞血藤質量較好。

2.5 同一條藤莖不同樹脂環紋數部位的雞血藤HPLC指紋圖譜研究

2.5.1 色譜條件

乙腈（A)～0.1%醋酸水溶液（B），梯度洗脫：0～25 min,10%～15%A;25～55 min,15%～25%A;55～95 min,25%～45%A;95～120 min,45%～70%A;120～130 min,70%～90%A;130～140 min,90%～100%A。柱溫：25℃；進樣量：10μL；流速：1 m L·min-1；運行時間140 min；檢測波長：260 nm。

2.5.2 對照品溶液的製備

精密稱取對照品原兒茶酸2.99 mg，芒柄花素2.10 mg，大豆苷元2.25 mg，兒茶素2.24 mg，染料木素2.46 mg，毛蕊異黃酮2.68 mg，表兒茶素2.37 mg，異甘草素1.09 mg，分別用甲醇定容於5 m L量瓶中，搖勻，作為貯備液。分別取原兒茶酸、芒柄花素、大豆苷元、兒茶素、染料木素、毛蕊異黃酮、表兒茶素及異甘草素對照品貯備液0.5 m L置10 m L量瓶中混合，用甲醇定容，搖勻，作為混合對照品溶液。對照品色譜圖見圖4。

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