為建立高效液相色譜法(HPLC)測定馬香苓口服液白術內酯Ⅲ含量的马香方法，用色譜柱為ZORBAX SB-C18，苓口立以水和甲醇為流動相梯度洗脫，服液方法流速0.8 mL/min，中白酯Ⅲ柱溫25℃，术内檢測波長223 nm，含量進樣量30μL。测定結果顯示，马香白術內酯Ⅲ檢測質量濃度在0.57μg/mL～73.00μg/mL範圍內與峰麵積積分值呈良好的苓口立線性關係(y=1.356 7x+0.857 6，R2=0.992，服液方法n=6)，中白酯Ⅲ精密度、术内重複性、含量穩定性試驗的测定平均相對標準偏差(RSD)分別為2.00%、8.58%和6.00%；加樣平均回收率為98.04%，马香RSD=11.89%，回收率良好。該方法準確穩定，簡便可行，能夠很好的控製馬香苓口服液白術內酯Ⅲ的含量，也為該製劑質量控製提供了一種有效的方法。

馬香苓口服液是由廣藿香、白術、馬齒莧等製成的純中藥口服液，臨床主要用於治療病毒引起的仔豬腹瀉。研究表明，該製劑工藝穩定可行，無刺激性，治療仔豬腹瀉總有效率達96%，治愈率達90%。為進一步控製該製劑的質量，便於臨床藥效學研究，故對該方劑做其定量的方法研究。白術具有健脾益氣，燥濕利水，止汗，安胎之功效；用於脾虛食少，腹脹泄瀉，痰飲眩悸，水腫，自汗，胎動不安。在馬香苓口服液中作為臣藥，它的主要成分作用為白術內酯Ⅰ、白術內酯Ⅱ、白術內酯Ⅲ和蒼術酮等，該類成分具有調節胃腸道功能和促進營養物質吸收的作用，也是控製白術藥材質量的主要指標之一。據報道，其白術內酯Ⅲ含量可以作為評定中藥散劑、口服液水提工藝等指標。因此，采用高效液相色譜法(HPLC)測定本製劑中白術內酯Ⅲ的含量並做方法學研究，可以為該製劑的質量標準提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥物與試劑

白術內酯Ⅲ(含量99.9%，20 mg， 批號：11978-201501)，中國食品藥品檢定研究院產品；馬香苓口服液，中國農業科學院蘭州畜牧與獸藥研究所研製(批號20160324、20160616、20160623、20160625、20160704、20160705、20160712、20160714、20160717、20160721)；甲醇(色譜純，規格1 L，批號20161006)，天津川普偉業科技有限公司產品；水為超純水，石油醚(60℃～90℃，批號20160901)煙台市雙雙化工有限公司產品；其餘有機試劑均為分析純。

1.1.2 儀器與設備

DIONEX UItiMate 3000高效液相色譜儀，美國賽默飛世爾科技公司產品；NewClassic MS 電子天平，梅特勒-托利多上海有限公司產品；Milli-Q型超純水機，美國Millipore公司產品；KQ 3200DE型數控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司產品。

1.1.3 色譜條件

色譜柱：ZORBAX SB-C18(5 μm×4.6 mm×250 mm， 美國Agilent Technologies)，以水和甲醇為流動相梯度洗脫(表1)，流速0.8 mL/min， 柱溫25℃，檢測波長223 nm， 進樣量30 μL。

1.2 方法

溶液製備：以甲醇和500 mL/L甲醇水溶液為空白溶液。精密稱取白術內酯Ⅲ1.46 mg， 置2 mL容量瓶中，加甲醇溶解並定容至刻度，密封，搖勻，即得濃度為0.73 mg/mL的對照品儲備液。精密移取白術內酯Ⅲ標準儲備液1 mL，置10 mL棕色容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，製成濃度為0.073 mg/mL，作為白術內酯Ⅲ對照溶液。量取中藥口服液25 mL於125 mL分液漏鬥，加石油醚(60℃～90℃)振搖提取4次，每次40 mL，收集上層石油醚有機溶液，水浴揮幹(水浴鍋溫度90℃)，殘渣加500 mL/L甲醇水溶液使其溶解，並定容至10 mL容量瓶，即得供試品溶液。取按處方比例並以同樣製備工藝的缺白術的陰性對照口服液，按供試品溶液製備法製得陰性對照溶液。

2 結果

2.1 專屬性試驗

取空白、對照品、供試品和陰性對照溶液，過0.22 μm有機微孔濾頭於1 mL進樣瓶中，密封，參照文獻並按色譜條件自動進樣測定，每個樣品進樣2次，記錄色譜圖(圖1)，結果白術內酯Ⅲ對照品溶液理論板數為13327；在與白術內酯Ⅲ對照品溶液色譜峰對應的位置上，供試品(26.063 min)與其對照品(26.419 min)保留時間一致，其理論塔板數為21420，且與其他組分分離度大於1.5；陰性對照溶液在對照品與供試液相應的保留時間內未檢出色譜峰，表明樣品中其他成分不幹擾白術內酯Ⅲ的測定。

2.2 線性關係考察

精密量取白術內酯Ⅲ對照液1 mL於2 mL容量瓶，加色譜甲醇定容至刻度，依次進行倍比稀釋得係列標準溶液，其濃度分別為73.00、36.50、18.25、9.13、4.56、2.28μg/mL，按色譜條件自動進樣上述係列溶液各30 μL，每個濃度進樣2次，記錄色譜圖並測定峰麵積。以白術內酯Ⅲ峰麵積(y)縱坐標，檢測質量濃度(x，μg/mL)為橫坐標進行線性回歸(圖2)，得回歸方程y=1.356 7x+0.857 6，R2=0.992，結果表明，白術內酯Ⅲ檢測質量濃度在0.57 μg/mL～73.00 μg/mL範圍內與峰麵積積分值呈良好的線性關係。

2.3 精密度試驗

精密量取對照品溶液，按色譜條件自動進樣30 μL，連續進針6次，記錄色譜圖，測定峰麵積。計算結果保留時間RSD=3.04%，相對峰麵積RSD=2.00%，表明儀器精密度良好。

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