山楂,离液別名山裏紅、体辅提紅果,助乙屬薔薇科類的醇法成分植物,其成熟的山楂素工果皮中含有豐富的山楂紅色素。山楂紅色素屬於天然花青素類色素,红色化及是艺优一種水溶性色素,其成分為花色苷類化合物,分析主要有矢菊色素-3-半乳糖昔、离液矢車菊色素-3-葡萄糖苷兩大類。体辅提山楂紅色素作為一種天然色素,助乙其安全性可靠,醇法成分沒有毒副作用,山楂素工可以用於食品的红色化及著色,以降低人工合成色素的艺优使用量,甚至可以完全替代人工合成色素。
離子液體是近年來被人類發現的新型介質,它在常溫下是一種呈液態的鹽,一般由有機陽離子和無機陰離子組成。由於其良好的化學穩定性、熱穩定性及不易揮發性,離子液體逐漸作為一種輔助劑被用於萃取分離領域。
一、材料與方法
1、材料與儀器
(1)試驗材料
山楂(大金星),河北省興隆縣;離子液體pH6(純度99%),上海寶曼生物科技有限公司;其他試劑均為分析純。
(2)儀器
ARll40電子分析天平,深圳市凱銘傑儀器設備有限公司;DELTA320pH計,上海存聯工貿有限公司;THZ-82A水浴恒溫振蕩器,常州榮華儀器製造有限公司;TDL-5-AL大容量低速台式離心機,北京天創尚邦儀器設備有限公司;EPOCH2全波長酶標儀,美國博騰儀器有限公司;安捷倫1290-6420超高壓液相串聯四級杆質譜聯用儀,美國安捷倫科技有限公司。
2、山楂粉的製備將新鮮山楂清洗幹淨,切塊,去核,於45℃的烘箱中烘烤。待山楂塊完全烘幹後,再用粉碎機粉碎,過80目篩,得到待用山楂粉,放於幹燥袋中備用。
3、山楂紅色素提取單因素試驗
(1)離子液體用量對山楂紅色素含量的影響準確稱取山楂粉末lg,選取離子液體的含量為總體積的0%、5%、10%、15%、20%、25%,液料比10:1mL/g,pH為3,在提取溫度為50℃的水浴恒溫振蕩器中提取45min。再在轉速為4500r/min的離心機中離心5min,靜置3min,取上清液,於533nm下測定吸光度。
(2)液料比對山楂紅色素含量的影響
準確稱取幹燥的山楂粉末19,離子液體用量為15%,設定液料比分別選取為4:1mL/g、5:1mL/g、10:1mL/g、15:1mL/g、20:1mL/g,pH為3,在提取溫度為50℃的水浴恒溫振蕩器中提取45min。再在轉速為4500r/min的離心機中離心5min,靜置3min,取上清液,於533nm下測定吸光度。
(3)提取時問對山楂紅色素含量的影響
準確稱取幹燥的山楂粉末1g,離子液體用量為15%,液料比為10:1mL/g,設定pH為3,在提取溫度為50℃的水浴恒溫振蕩器中分別提取10min、30min、50min、70min、90min。再在轉速為4500r/min的離心機中離心5min,靜置3min,取上清液,於533nm下測定吸光度。
(4)溶液pH對山楂紅色素含量的影響
準確稱取幹燥的山楂粉末1g,設定離子液體用量為15%,液料比為10:1mL/g,設定pH分別為1、2、3、4、5、6,在提取溫度為50℃的水浴恒溫振蕩器中提取50min。再在轉速為4500r/min的離心機中離心5min,靜置3min,取上清液,於533nm下測定吸光度。
(5)提取溫度對山楂紅色素含量的影響
準確稱取幹燥的山楂粉末1g,設定離子液體用量為15%,液料比為10:1mL/g,調節溶液pH為2,分別在溫度為30℃、45℃、60℃、75℃、90℃下提取,再在轉速為4500r/min的離心機中離心5min,靜置3min,取上清液,於533nm下測定吸光度。
4、Plackett-Burman試驗設計
在單因素試驗的基礎上,本試驗選取影響較大的5個因素,選用變量個數N=12的Plackett-Burman設計表,加入2個虛擬變量,用於考察試驗誤差,以此篩選出主要的影響因素。各因素所代表參數、水平見表1。
5、響應麵優化法設計試驗
為了確定山楂紅色素提取的最優條件,在Design—Expert分析軟件中設定液料比、提取時間和pH這三個因素的取值範圍如表4。
根據表4,用Design-Expert分析軟件安排試驗方案,並按2.3的單因素試驗方法進行試驗,試驗結果見表5。
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