2.2 單因素優化BPO檢測體係

2.2.1 檢測波長對檢測體係的分光法快粉中影響

2.2.1.1 最佳波長的確定

選擇不同濃度的BPO標準溶液，分別在波長480、光度490、速检售婴500、测市510、儿奶520、氧化530和540nm下采用1cm的苯甲比色皿測定其吸光度，如圖2。分光法快粉中

根據吸光度的光度大小確定最適檢測波長，其中吸光度越大說明檢測體係在相應波長下響應性能最好，速检售婴由圖2所示，测市該體係在510nm處BPO的儿奶吸光度最高，說明在檢測波長為510nm條件下，氧化檢測體係的苯甲靈敏度最高，響應性能最好，分光法快粉中故篩選最適檢測波長為510nm。

2.2.1.2 方差分析

將在各個波長下所測的吸光度的數值進行單因素方差分析，結果見表1。如表1所示，P=0.0001，P＜0.01，所以檢測波長對BPO檢測體係具有非常顯著的影響。

2.2.2 緩衝液pH對檢測體係的影響

2.2.2.1 最佳pH的確定

由於BPO隻能在酸性條件氧化Fe²⁺為Fe³⁺，發生褪色反應，因此設定pH範圍在3～6之間。在優化後得到的最適波長條件下，分別設定緩衝液pH為3.5、3.8、4.1、4.4、5.1、5.4和6.0時采用1cm的比色皿測定BPO標準溶液的吸光度，根據吸光度的大小確定最適緩衝液pH，其中吸光度最大處對應緩衝液的最佳pH條件，如圖3。

由圖3所示，初期吸光度隨著緩衝液pH的升高而逐漸變大，在體係緩衝液的pH為4.4時，吸光度數值達到最高，為0.616。當緩衝液的pH繼續升高時，體係的吸光度值又開始出現下降趨勢。鑒於本反應為褪色反應，因此選擇吸光度較低的數值為最優水平，故篩選最適緩衝液pH為6。

2.2.2.2 方差分析

將在不同緩衝液pH條件下所測的吸光度的數值進行單因素方差分析，結果見2，P=0.0001，P＜0.01，由此得出，緩衝液pH對BPO檢測體係的影響非常顯著。

2.2.3 反應溫度對檢測體係的影響

2.2.3.1 最佳反應溫度的確定

設定反應溫度為室溫（約23℃）、30、40、50和60℃，采用1cm的比色皿測定BPO標準溶液的吸光度，根據吸光度的大小確定最適反應溫度，如圖4。

由圖4可知，在反應初期其吸光度出現最大值，隨著反應溫度的升高，吸光度開始下降，當溫度為50℃時，吸光度降至最低點。但伴隨溫度的提升，吸光度又開始上升，在溫度超過60℃時，吸光度又出現下降趨勢，這種反複的現象說明，在當反應溫度超過為50℃時，檢測體係對溫度的響應已經出現了不穩定的情況，鑒於此篩選最適反應溫度為50℃。

2.2.3.2 方差分析

將在各個波長下所測的吸光度的數值進行單因素方差分析，結果如表3所示。結果表明，P=0.0001，P＜0.01，所以反應溫度對BPO檢測體係的影響非常顯著。

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