（4）液相色譜條件

色譜柱：以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，葡萄DikmaDiamons訂C18（4.6mm×150mm，籽维中原5μm）；流動相：甲醇；流速：1.0mL/min；檢測波長：284nm柱溫：30℃；進樣量：10μL。生素素和素E速测

（5）標準溶液工作曲線

精密稱取105℃幹燥至恒重的胶囊原花青素對照品28.63mg和維生素E醋酸酯對照品12.42mg於同一個10mL容量瓶中，加適量甲醇溶解並稀釋至刻度，花青搖勻，维生得到混合對照品貯備液。快定該貯備液避光保存。葡萄混合標準貯備液適量，籽维中原逐級稀釋，生素素和素E速测配製成原花青素濃度為0.2806、胶囊0.8417、花青1.4028、维生1.9640、快定2.8057mg/mL，葡萄維生素E醋酸酯濃度為0.1236、0.3707、0.6179、0.8651、1.2358mg/mL的混合標準溶液，以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，DikmaDiamons訂C18（4.6mm×150mm，5μm）；流動相：甲醇；流速：1.0mL/min；檢測波長：284nm柱溫：30℃；進樣量：10μL。的色譜條件進樣分析，記錄色譜圖。以峰麵積積分值為縱坐標，對照品濃度為橫坐標，進行線性回歸，原花青素在0.2806～2.8057mg/mL濃度範圍內，維生素E醋酸酯在0.1236～1.2358mg/L濃度範圍內呈良好的線性關係。二者的線性相關係數均為0.999以上，兩組分線性回歸方程、相關係數如表1所示。

二、結果與分析

1、紫外最大吸收波長的選擇

將維生素E醋酸酯對照品溶液注入液相色譜儀（配備DAD紫外檢測器），開啟光譜采集，在主成分峰位置觀察最大吸收波長（見圖2）。結果表明：維生素E醋酸酯對照品的最大吸收波長與檢測波長284nm一致。

2、樣品處理時超聲時間的選擇

本試驗同時考察5個不同超聲提取時間，分別為5min，10min，20min，30min，40min，對原花青素及維生素E加標樣品的提取效果，回收率隨時間變化關係如圖3。

結果顯示，在超聲提取5min情況下，樣品中原花青素和維生素E兩組分提取不完全，回收率較低；當超聲時間延長至10min時，兩組分回收率有所增加，當超聲提取時間延長至20min時，提取液中兩組分回收率均達到最高；超聲提取30min、40min後兩組分回收率基本穩定且略有下降，因此實驗采用超聲提取20min的方法可有效提取葡萄籽維生素E軟膠囊中的原花青素和維生素E。

3、穩定性考察

稱取葡萄籽維生素E軟膠囊（批號20190115）內容物約100mg，精密稱定。精密稱取葡萄籽維生素E軟膠囊（批號20190115）內容物0.1g於25mL燒杯中，加入10mL甲醇，置於70℃水浴中加熱，振搖使內容物分散，立即轉移至25mL容量瓶中，再用10mL甲醇分三次洗滌燒杯，洗滌液轉入容量瓶，超聲提取20min，取出，冷卻至室溫，用甲醇定容至刻度，搖勻，經0.22μm微孔濾膜過濾，作為供試品溶液。分別於製備後0，2，4，6，8，10，12h進樣測定，記錄色譜圖，計算得12h內原花青素色譜峰麵積RSD為0.3％，維生素E醋酸酯色譜峰麵積RSD為0.1％，說明供試品溶液在12h內穩定（見表2）。

4、重複性試驗

稱取葡萄籽維生素E軟膠囊（批號20190115）內容物6份，每份約100mg，精密稱定。精密稱取葡萄籽維生素E軟膠囊（批號20190115）內容物0.1g於25mL燒杯中，加入10mL甲醇，置於70℃水浴中加熱，振搖使內容物分散，立即轉移至25mL容量瓶中，再用10mL甲醇分三次洗滌燒杯，洗滌液轉入容量瓶，超聲提取20min，取出，冷卻至室溫，用甲醇定容至刻度，搖勻，經0.22μm微孔濾膜過濾，作為供試品溶液。計算得6份樣品原花青素與維生素E（以α-生育酚計）含量平均值分別為41.44g/1009（RSD為0.9％）、16.80g/100g（RSD為1.1％），表明本法重複性良好（見表3）。

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