除了色譜柱填料粒度直徑為亞2 pm外，高效還有采用的液相進樣器與檢測器與高效液相色譜的也有所不同。選擇最高精度和最低擴散的色谱固定環進樣器(SM-FL)或者選擇高回收率、高精度、高效寬線性動態範圍的液相流通針式進樣器(SM—FTN)。雙通道紫外檢測器或二極管陣列檢測器為高速檢測器，色谱采樣速率高，高效能準確積分快速流出的液相組分。
六、色谱高效液相色譜儀的高效日常維護
高效液相色譜儀需要日常精心的維護和保養，以便儀器處於正常的液相工作狀態，延長儀器、色谱色譜柱的高效使用壽命，保證分析數據的液相準確可靠。
(一)高壓泵的色谱日常維護
長色譜柱或使用了很長一段時間的色譜柱，或加大流動相的流速，柱壓會明顯提高，高壓泵的噪聲也會加大，這屬於正常現象。高壓泵的高壓限製自動保護值不要設置太高，高效相色譜儀日常分析為20～30 MPa。當超壓報警，高壓泵停止泵液時，要逐級拆開管路，找出堵塞處排除後，再複位工作。每次超壓都會對泵封帶來影響，有可能會導致基線噪聲加大。在維修高壓泵時要特別小心，防止固體顆粒進入泵體，劃傷密封墊、閥球、座和柱塞。防止折斷柱塞杆。如果高壓泵工作時，壓力顯示波動大於5%，通常提示需要停泵排氣泡或清洗單向閥或應更換密封墊。
(二)對流動相的要求
所用的流動相和樣品溶液必須經過0.45 μm或0.2μm的濾膜過濾才能上機使用。即使過濾後在分析柱前也要加裝保護柱或過濾器。流動相所用的水必須新鮮，可以用超純水製備儀或自行蒸餾，水質應符合《分析實驗室用水國家標準》(GB／T 6682--2008)規定的實驗室一級水規格。通常的做法是對電熱蒸餾水再用全套玻璃蒸餾器重蒸餾一次。要注意用超聲波清洗器定期在稀硝酸或甲醇中清洗過濾頭，過濾頭不通暢容易導致進入高壓泵的流動相在管線中產生氣泡。流動相在一定pH下操作時，要注意空氣中CO2溶解在流動相內對pH變化的影響。更換流動相時，如果兩種流動相互不相溶，需采用過渡溶劑(如異丙醇等)將前一種流動相逐步溶解徹底洗脫後才能換流動相。
(三)進樣係統的維護
使用指定的進樣器，防止進樣器針頭劃傷閥體。在農藥殘留分析周期內，不要進行有幹擾的常量分析。必要時要用乙腈、甲醇、水等反複清洗進樣口。空走或進樣溶劑確認進樣口的潔淨狀態。
(四)色譜柱的日常維護
每次開機時，流量要逐漸增加或降低，避免突然增壓或降壓，使柱床受到衝擊，產生空隙。不要接反柱頭或其他連接擰得太緊，不漏液即可，如果擰得過緊易損壞接頭螺紋。要注意使用的色譜柱pH範圍，超出使用範圍、超室溫使用、樣品淨化差、超壓衝擊都會縮短色譜柱的使用壽命。在使用緩衝溶液作流動相時，更換乙腈或甲醇前，一定要用水將鹽衝洗幹淨，否則鹽沉積可能導致色譜柱徹底堵塞報廢。高效液相色譜柱與氣相色譜毛細管柱不同，保護再好也有一定的使用壽命。毛細管柱在防止幹燒的情況下，可以有很長的壽命。液相色譜柱的壽命與流動相種類及處理、色譜儀操作的流量和壓力、樣品的淨化處理有關。色譜柱是否報廢，主要取決於對樣品的分離度和在一定流量下的柱壓。不要試圖擰開色譜柱管，這樣重新擰上會導致柱效顯著下降，色譜柱提前報廢。色譜柱經過反衝、清洗和再生往往很難使柱效恢複。色譜柱中的填料隨溫度升降產生膨脹和收縮，在某些情況下，溫度突然變化會損壞柱床，因此使用時溫度要逐漸升高，實驗結束時色譜柱慢慢降到室溫再停泵。每次實驗結束後，反相色譜操作方式要用l00%乙腈或甲醇衝洗色譜柱20 min以上才能關機。拆卸後的色譜柱兩端用盲頭螺絲擰緊，防止封存的溶劑揮發。反相填料通常要用乙腈或甲醇，正相鍵合相用2，2，4-三甲基戊烷或按照色譜柱使用和維護指南要求封存保管。
(五)儀器組件連接和管路選擇
使用的管路長度越短，內徑越細，色譜峰形越窄。現在高效液相色譜普遍使用PEEK材料(最高耐壓40 MPa)管路和接頭，突出的優點是不需要動用扳手，用手擰緊就可以達到不漏液的效果，並且對有些化合物分析會獲得滿意色譜峰形。
(六)工作站的維護和升級
配備色譜工作站的液相色譜儀，通常由儀器生產廠商專門開發的軟件操作係統來控製儀器的工作狀態和數據處理。在安裝和使用這類軟件時要注意適用的計算機操作係統的版本和語言，對計算機的硬件設備要安裝驅動軟件，使之正常工作，否則可能導致計算機經常死機、亂碼，影響正常的分析工作。要對原機器帶來的軟件進行拷貝或妥善存檔。高效液相色譜儀工作站版本升級通常要付費。高效液相色譜儀的操作人員要具備計算機的知識並能熟練操作，能解決實際分析工作中遇到的問題。對於不具備這方麵能力的人要進行培訓，非工作人員不可隨便啟動計算機和液相色譜儀。為了和外界通信(網絡連接或收發電子郵件等)，有的計算機必須安裝使用雙網卡。登錄因特網後可能導致產生儀器主機無法與計算機工作站連接的問題。解決這個問題可以嚐試有些殺病毒軟件帶的LSP修複工具。但有些實驗室為了安全、管理的需要，可能不允許使用或安裝雙網卡。
七、高效液相色譜法的定性分析與定量分析
在定性分析方麵，除采用與標準物質的相對保留時間比對外，還可以利用檢測器的選擇性、紫外檢測器全波長掃描功能、改變流動相組成時農藥的保留值變化規律進行定性分析。在農藥殘留分析上通常采用外標法進行定量分析，較少采用內標法。在農藥原藥和製劑定量分析上，當對分析準確度和精密度有較高要求時，可采用內標法分析。內標物通常選用農藥殘留標準中規定的內標物或鄰苯二甲酸酯類同係物。除非是建立方法研究，日常依據標準的檢測分析隻采用單點校正或兩個濃度標準溶液建標進行測定。
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