欢迎来到證券網市場財經网首页

表没食子儿茶素没食子酸酯稳定性研究(三)

来源:时间:2025-05-04 09:01:08

2.2 EGCG穩定性的表没改變對NCM460細胞的胞內、外H202濃度影響

2.2.1 細胞內H202水平的食儿酸酯檢測

對比不同處理時間點發現,胞內H202濃度呈現先上升後下降的茶素趨勢;與對照組0μmol/L相比,H202濃度lh內出現了短暫增高,没食其中80μmol/L組極顯著增高(P<0.001)(圖6a),稳定處理3h後,性研與對照組相比高濃度EGCG中的表没H202濃度出現顯著下降(P<0.05)(圖6c),這種現象在處理12h後更顯著(P<0.001)(圖6d)。食儿酸酯

2.2.2 胞外H202水平的茶素檢測

結果顯示,隨著處理時間的没食延長,培養體係中H202濃度呈現上升趨勢;對比相同時間不同濃度組發現,稳定處理2、性研3、表没6、食儿酸酯12h後,茶素20、40、80μmol/L的處理體係H202濃度顯著高於對照組(P<0.05),即培養體係巾的H202濃度隨時問延長和EGCG濃度的增加而顯著上升,處理24h後胞外的H202水平出現明顯降低,見圖7。

3 討論

EGCG的多種生物活性已在細胞培養模型中得到證實,其中最顯著的為抗氧化、抗炎和抗癌作用,這表明EGCG很可能成為因ROS增加和/或細胞抗氧化能力不足引發的退行性疾病的臨床藥物。然而,EGCG在相應動物實驗中的結果是存在爭議的。依據EGCG結構特征,其在細胞培養物中和整個生物體中的活性不一致可能歸因於EGCG分子的穩定性不足,EGCG不受控的降解或聚合,不僅會導致體外研究結論不準確,還會限製EGCG在體內的生物利用度。

本實驗發現不同的溶液環境對EGCG的氧化聚合有較明顯影響,在DMEM培養液中EGCG的聚合效率更高,而H2O的影響較小,這與Krupkova等的研究結果吻合;高溫促進了EGCG的自動氧化,Krupkova等也證實低溫可以保持EGCG的穩定性;不同EGCG濃度下EGCG的氧化聚合程度不同,高濃度促進EGCG的聚合,同時,隨著反應時問的增長,EGCG的聚合物增多;溶液pH對EGCG的穩定性也有較明顯影響,EGCG在酸性環境中更加穩定(pH<6),這與相關研究相符。由此可見,溶液環境、溫度、反應時問、EGCG濃度和溶液pH等因素均會影響EGCG的穩定性,在相關實驗條件下應給予考慮。已有研究證實,環境是確定EGCG抗澱粉樣蛋白功效的關鍵因素,因此,解析EGCG穩定性的環境條件對於進一步研究其在機體中發揮功效的機製有重要意義。

在正常培養細胞體係巾探討了EGCG的穩定性對其抗氧化能力的影響,發現胞外H202水平在時間和濃度效應上與對照組相比呈上升趨勢,而胞內出現先上升後下降的趨勢。研究分析,EGCG在培養體係中會發現氧化聚合反應,生成H202;隨後,H202進入細胞,使胞內H202水平迅速上升,給細胞造成氧化脅迫,激活胞內的抗氧化係統應對脅迫,隨著抗氧化酶係的積極響應,胞內H202水平出現短暫上升然後開始下降,最終表現為EGCG處理後,細胞內H202濃度低於未處理細胞,表現為抗氧化效應,特別是20μmol/L組,這一過程可能是EGCG發揮生物活性,特別是在抗增殖和癌症治療中的潛在作用。如20μmol/L的EGCG是其通過預警響應發揮抗氧化活性的最適濃度,隨著EGCG濃度的升高,氧化聚合反應產生的H202水平超過細胞氧化應激範圍,可能對細胞造成氧化損傷,詳細分子機製有待進一步驗證。

4 結論

RPMI1640和DMEM培養基較H202更促進EGCG的氧化聚合,低溫低EGCG濃度及酸性條件利於EGCG的穩定,同時EGCG的氧化聚合隨反應時間延長而加劇。存含有細胞的培養體係中,EGCG也會發生自動氧化聚合並產生H202,導致細胞內外的H202濃度升高,但胞內H202濃度呈現先上升後下降的趨勢。研究結果提示,一定濃度的EGCG在培養細胞中可能通過氧化聚合產生H202,形成氧化脅迫,進而激活細胞內抗氧化防禦係統,使細胞內H202濃度隨後降低,表現出抗氧化效應。

聲明:本文所用圖片、文字來源《食品工業科技》,版權歸原作者所有。如涉及作品內容、版權等問題,請與本網聯係

相關鏈接:L-穀氨酰胺胰蛋白酶兒茶素表沒食子兒茶素沒食子酸酯