將甘草、复方分板藍根、中草作用金銀花、药超陳皮、微粉肉桂和杜仲按一定比例配製成傳統中草藥添加劑和超微粉添加劑,添加研究其對草魚生長的剂对影響,為研究超微粉中草藥添加飼料積累資料,草鱼為魚類養殖的生长科學和可持續發展提供依據。超微粉碎技術是和肌近年發展起來的一項新技術,是肉成指利用機械或流體動力的方法使物料破碎,進而將直徑超過3mm的复方分物料顆粒粉碎至10~25μm的操作技術。這種技術用於中成藥,中草作用可以提高藥物有效成分的药超溶出率,進而降低藥材用量,微粉也能夠提高生產過程中的添加衛生質量。因此,超微粉中草藥添加於飼料,能夠充分保留生物活性成分,提高藥物吸收率和生物利用率,增強藥效,節省原料。然而,有關超微粉中草藥添加劑對魚類生長、免疫的影響,報道不多。因此,本實驗擬將不同質量百分比的超微粉碎複方中草藥添加到基礎飼料,並投食給草魚,連續飼養,探討對草魚生長及其肌肉成分的影響。
1材料與方法
1.1中草藥製劑及飼料
甘草、板藍根、金銀花、陳皮、肉桂和杜仲等中草藥均購自漢中市第二藥材公司。傳統中草藥添加飼料製備:按質量等比例取6味中草藥,水洗,加水浸泡30min,第一次煎煮45min,將藥汁倒出,再加水煎煮30min,將2次藥汁合並、過濾、濃縮成1ml藥液相當於1g中草藥幹物質的製劑,經高壓滅菌後存放於冰箱(4℃)。使用時將中草藥藥液按2%的比例反複噴灑於基礎飼料上,隨後攪勻晾幹,裝袋備用。
超微粉添加飼料製備:取烘幹(55℃)的中草藥於普通粉碎機粉碎成40目左右粗粉,然後置於超微粉碎機(KC-701,北京開創同和科技發展有限公司)粉碎,過300目篩(約相當於48μm),再將中藥超微粉置於水中,加熱煮沸,使超微粉末完全溶解於水中。待溶液冷卻後,濃縮成1ml相當於1g的生藥幹物質,經高壓滅菌後存放於冰箱(4℃)。使用時將濃縮藥液均勻噴灑於基礎飼料,最終製成含中草1%、2%、3%的飼料,晾幹,裝袋備用。
實驗用基礎飼料組成:魚粉20%,豆粕28%,菜粕23%,麵粉10%,麩皮14%,魚油2%,磷酸二氫鈣1.5%,微量礦質元素預混料0.5%,多種維生素預混料0.2%,氯化膽堿0.3%,黏合劑0.5%。購於陝西正大有限公司。
1.2分組與飼養管理
實驗魚為草魚,購置於漢中市城固某養殖場,實驗前暫養7d。實驗開始時,選取健壯、活潑、大小基本一致、體重平均為(21.18±0.06)g的100尾草魚作為實驗魚,隨機分裝在個5個水族箱中,每箱放養10尾實驗草魚,其中對照組設為C,對照組投喂基礎飼料;實驗組設為T1、T2、T3和T4,分別投喂含2%的傳統中草藥添加飼料和含1%、2%和3%超微粉中草藥添加的飼料。每組設置2個平行實驗。
玻璃水族箱規格為80cm×50cm×45cm。實驗用水為曝氣48h的自來水,每天上午8:00吸走剩餘飼料和糞便,清理水族箱,同時換水1次,換水量約為1/3。實驗期間利用充氣泵充氣增氧,水溫控製22~25℃,保持溶氧6.0mg/l以上,pH值6.8~7.6。實驗共進行56d。每天8:30投飼1次,日投喂量為魚總體重的3%。
1.3生長指標及測定方法
增重率(%)=(實驗末尾均重-實驗初尾均重)×100/實驗初尾均重特定生長率(%/d)=(ln實驗末尾均重-ln實驗初尾均重)×100/養殖天數成活率(%)=成活尾數×100/總尾數
1.4肌肉成分分析方法
實驗結束後,各處理組隨機取3尾魚,解剖取其背部肌肉凍存於-20℃冰箱備測。肌肉成分分析包括肌肉粗蛋白、粗脂肪、水分和粗灰分。利用GB5009.5—2016《食品安全國家標準食品中蛋白質的測定》檢測粗蛋白含量;利用GB5009.6—2016《食品安全國家標準食品中脂肪的測定》檢測脂肪含量;利用
GB5009.3—2016《食品安全國家標準食品中水分的測定》檢測水分含量;利用GB5009.4—2016《食品安全國家標準食品中灰分的測定》檢測灰分含量。
1.5數據處理
實驗結果以“平均值±標準差(M±SD)”表示。采用SPSS19.0軟件進行單因素方差分析,用Duncan's多重比較法分析實驗組間的差異,差異顯著水平為P<0.05。
2結果
2.1複方中草藥添加劑對草魚生長的影響(見表1)
從表1可知,添加不同比例的中草藥均可提高草魚的增重率,提高特定生長率,而且除T3和T4之間差異不顯著外(P>0.05),其餘各組之間差異均顯著(P<0.05)。添加超微粉的飼料,其增重率和特定生長率較添加傳統方法製備的飼料的效果好,T1和T3(劑量相同2%)之間比較,T3比T1的特定生長率高38.18%,增重率高40.20%。添加超微粉複方中草藥飼料的各組,其增重率和特定生長率隨中草藥含量的升高而提高。此結果說明,中草藥添加劑對草魚的生長有促進作用,並且超微粉中草藥添加組的效果好於傳統中草藥添加組。
2.2複方中草藥添加劑對草魚肌肉基本成分的影響(見表2)
由表2可知,飼料添加複方中草藥對草魚肌肉水分、灰分和粗脂肪含量無明顯影響(P>0.05),但對粗蛋白含量有顯著影響,並且隨著中草藥含量的增加,魚肌肉粗蛋白含量也在升高。與C(對照組)比較,T1肌肉粗蛋白含量提高了5.16%,T2肌肉粗蛋白含量提高了7.81%,T3肌肉粗蛋白含量提高了12.97%,T4肌肉粗蛋白含量提高了14.74%。經方差分析和多重比較,對照組(C)與所有實驗組差異顯(P<0.05),T1與T2差異不顯著(P>0.05),但T1與T3、T4差異顯著(P<0.05),T3與T4差異不著(P>0.05)。可見,飼料中添加複方中草藥能明顯增加草魚肌肉蛋白質含量,並且超微粉中草藥添加組的效果優於傳統中草藥添加組。
3討論
3.1複方中草藥添加劑促草魚生長的作用
根據中醫理論,所選6味草藥,多味甘、溫性,具有和中緩急、理氣調中、健脾、開胃的功效,對消化係統的功能具有很好的調理作用,能夠提高消化功能,促進營養物質的吸收,增強機體代謝,促進生長,這點也被現代實驗研究所佐證。例如,石英等實驗發現,杜仲葉提取物可顯著提高異育銀鯽腸道蛋白酶活性和幹物質消化率、粗蛋白消化率,從而改善魚體生長性能。而且,杜仲含有多種有機酸和芳香油成分,能促進動物消化液的分泌,其中的綠原酸還具有類似腎上腺素的功效,可提高中樞神經係統的興奮性,促進消化道括約肌的收縮,這些功能活動促進了動物對營養物質的吸收和利用。
蔡東森等實驗結果表明,飼料添加0.15%甘草次酸,將團頭魴幼魚腸道蛋白酶活性由82.36U/mg提高到103.75U/mg,二者差異顯著(P<0.05)。彭小玉等[7]將2%蒲公英水提物添加於飼料中飼喂鯽魚,結果發現,蒲公英水提物顯著提高了鯽魚澱粉酶和蛋白酶的活性(P<0.05),促進營養物質的消化吸收,進而促進動物的生長發育。亦有研究顯示,飼料中添加肉桂能夠增強大鼠的糖類代謝,促進糖類轉化為脂肪和蛋白質[8],肉桂或許在魚類的代謝中也具有類似的效應。
3.2複方中草藥添加劑對草魚肌肉蛋白質含量的影響
飼料中添加複方中草藥提高了草魚肌肉中蛋白質含量,可能與中草藥能夠提高草魚消化道蛋白酶的活性,促進水產動物機體代謝和蛋白質的合成有關。邱小琮等報道,在飼料中分別添加0.5%、1%、2%複方中草藥,結果發現,異育銀鯽的蛋白質消化率極顯著地高於對照組(P<0.01);石英等試驗結果顯示,0.15%的杜仲葉提取物提高了異育銀鯽蛋白質效率11.6%、粗蛋白消化率4.0%,這些實驗研究說明,飼料添加中草藥都可提高營養物質消化率,促進消化道蛋白質的消化吸收,促進機體蛋白質的積累。
3.3超微粉複方中草藥添加劑的作用
本實驗結果顯示,飼料中添加超微粉中草藥,不論是對草魚的生長,還是對草魚肌肉營養成分的積累,都表現出比傳統中草藥製劑添加具有更好的效應。
超微粉碎技術是指利用衝擊、碰撞、剪切、研磨、分散等方法使物料破碎,直徑達到10~25μm的操作技術。中草藥經超微粉碎後破壞了大部分細胞的細胞壁,有效成分就很容易釋放出來,可明顯提高藥物成分的釋放速率和釋放量,因此小劑量超微粉藥材的藥效就可達到或超過大劑量普通粉碎藥材的藥效。黃一帆等比較了超微粉碎黃連解毒湯和普通粉碎黃連解毒湯中黃芩苷的溶出量,結果顯示,在沒有改變黃連解毒湯原有藥效學成分的同時,超微粉碎黃連解毒湯增加了黃芩苷的溶出量,開水衝攪條件下,超微細粉黃連解毒湯黃芩苷含量比普通粉碎提高51.23%。張明等比較了超微粉碎與普通粉碎大黃蒽醌浸出率,結果顯示,超微粉碎大黃蒽醌的浸出率顯著高於普通粉碎大黃蒽醌浸出率。
超細微粉技術製成的糖泰膠囊,其降低正常小鼠血糖、鏈脈黴素造模糖尿病小鼠血糖、四氧嘧啶造模糖尿病大鼠血糖的效應均顯著大於傳統粉碎技術製成的糖泰膠囊的降血糖效應(P<0.05)。
本實驗的結果也表明,1%超微粉複方中草藥添加的效果優於2%傳統複方製備的中草藥添加的效果。可見超微粉處理中草藥,提高溶出量,有利於藥物的釋放和吸收,增強了藥效,減少使用量。藥物經超微粉碎後可不再經過浸提、煎煮等處理,減少了中間環節和有效成分的損失,最大限度地利用了原材料,提高產效率,降低生產成本。本實驗說明,甘草、板藍根、金銀花、陳皮、肉桂、杜仲等6味中草藥飼料添加劑能夠促進草魚生長,增加肌肉蛋白質積累;超微粉中草藥添加飼料的效果優於傳統複方製備的中草藥添加的效果。但是,由於時間和條件所限,研究尚不夠深入,有關超微粉添加飼料的作用機製以及對機體其他功能的影響還需要作進一步的探討。
4結論
中草藥添加劑對草魚的生長有促進作用,並且超微粉中草藥添加組的效果好於傳統中草藥添加組。飼料中添加複方中草藥能明顯增加草魚肌肉蛋白質含量,並且超微粉中草藥添加組的效果優於傳統中草藥添加組。
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