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基于气相指纹图谱技术研究鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和干白扁豆花的成分(一)

来源:时间:2025-04-21 20:48:24

白扁豆花是基于技术豆科扁豆屬植物扁豆Dolichos lablab L.的幹燥花,呈扁平不規則三角形,气相具有解暑化濕、指纹和中健脾之功效,图谱用於治療痢疾、研究泄瀉、鲜白赤白帶下等症,扁豆扁豆扁豆在我國具有悠久的花冻花和花應用曆史。經典名方“新加香薷飲”中采用的干白干白是鮮白扁豆花,而有的成分則采用的是幹扁豆花,兩者內在成分的基于技术差異可能決定了其藥效的差異。本項研究的气相目的在於研究鮮白扁豆花、凍幹白扁豆花和曬幹白扁豆花的指纹成分差異,為凍幹扁豆花替代鮮扁豆花提供科學的图谱數據支持,同時,研究通過氣相質譜(GC-MS)方法對鮮白扁豆花的揮發性化學成分進行鑒定,這些揮發性成分的鑒定,為白扁豆花的藥理和臨床應用提供基礎支持。

1 材料

1.1 儀器與試劑

Agilent7890B氣相(GC)色譜儀,Agilent 7890B-7000C GC-MS聯用儀(配有Mass Hunter質譜工作站, NIST 14標準譜庫),中藥色譜指紋圖譜相似度評價係統2012版本;甲醇(色譜純)。

1.2 樣品

白扁豆花采自於河北中醫學院藥草園,白扁豆種子經河北中醫學院王乾老師鑒定為Dolichos lablab L.的種子。

2 方法與結果

2.1 樣品的處理

2.1.1 鮮白扁豆花:

摘取鮮白扁豆花立即置於-80℃低溫冰箱中,冷凍,而後於液氮中研碎,稱取1 g, 加入25 mL容量瓶中,加入15 mL甲醇,回流30 min, 放冷至室溫,用甲醇定容至刻度,搖勻,過0.45 μm濾膜,進樣1 μL 進行測定。

2.1.2 凍幹白扁豆花:

摘取鮮白扁豆花立即置於-80 ℃低溫冰箱中,而後於冷凍幹燥機內凍幹,研碎,稱取1 g, 加入25 mL容量瓶中,加入15 mL甲醇,回流30 min, 放冷至室溫,用甲醇定容至刻度,搖勻,過0.45 μm濾膜,進樣1 μL 進行測定。

摘取鮮白扁豆花,曬幹,研碎,稱取1 g, 加入25 mL容量瓶中,加入15 mL甲醇,回流30 min, 放冷至室溫,用甲醇定容至刻度,搖勻,過0.45 μm濾膜,進樣1 μL 進行測定。

2.2 GC色譜條件

2.2.1 GC色譜指紋圖譜條件:

DB-1毛細管色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);程序升溫:柱初始溫度為80 ℃,以10 ℃ /min的速率升至300 ℃,保持10 min; 進樣口溫度:300 ℃;載氣:N2;載氣流速:1 mL/min; 分流比:20 ∶1。

2.2.2 GC-MS色譜條件:

色譜柱、升溫程序同GC色譜指紋圖譜條件;載氣:He; 載氣流速:1 mL/min; 分流比:100 ∶1。EI離子源;離子源溫度:230 ℃;四極杆溫度:150 ℃;電子能量:70 eV;接口溫度:280 ℃;質量範圍:50~600 m/z。

3 結果與討論

3.1 方法學研究

主要針對進樣精密度、樣品重複配製後的重複性以及樣品溶液的穩定性進行研究,以鮮扁豆花為研究對象,將所得的圖譜導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價係統(2012版),通過各色譜圖之間相似度比值,進而確定方法的適用性。本方法的精密度、重複性和穩定性研究相似度均在0.99以上,說明方法適用性良好。

3.2 各類白扁豆花成分的差異

對鮮白扁豆花、凍幹白扁豆花和幹扁豆花的成分進行分析,每個種類的樣品分別重複檢測3次,采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價係統(2012版)對結果進行分析。分析結果見圖1、表1。

從圖1的結果可以看出,鮮白扁豆花、凍幹白扁豆花和幹白扁豆花種類內部之間,差異較小,說明該方法的重現性較好;鮮白扁豆花和凍幹白扁豆花之間的相似度在0.950以上,說明相似度非常接近;鮮白扁豆花和幹白扁豆花之間的相似度在0.720左右,有較大的差異。根據氣相圖譜可以看出,鮮白扁豆花、凍幹白扁豆花和幹扁豆花之間成分的種類並無顯著的差異,僅是成分的含量差異較大。從提取溶液的顏色來看,鮮白扁豆花和凍幹白扁豆花為綠黃色,而幹白扁豆花為淺黃色。

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